Пустырника трава

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Пустырника трава		ФС.2.5.0034
Leonuri herba		Взамен ФС.2.5.0034.15

 

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу начала цветения и высушенная трава дикорастущего и культивируемого травянистого растения пустырника пятилопастного – Leonurus quinquelobatus Gilib. и пустырника сердечного (пустырника обыкновенного) – Leonurus cardiacaL. (L. cardiaca, L. subsp. villosus (Desf.) Jav.), сем. яснотковых– Lamiaceae.ХРАНЕНИЯСИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Содержит:

- не менее 0,2 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье;

- не менее 15 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 % в пересчёте на сухое сырьё.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Верхние части стеблей, длиной до 40 см с цветками и листьями, могут встречаться отдельные листья, цветки, части соцветий и стеблей. Стебель четырёхгранный, опушённый, или опушение только по рёбрам, полый, толщиной до 0,5 см. Листья супротивные, нижние – трёх-, пятилопастные или раздельные, в соцветиях – трёхлопастные или ланцетовидные, зубчатые или цельнокрайние с клиновидным основанием, длиной до 14 см, шириной до 10 см. Соцветия колосовидные, прерванные; цветки и бутоны собраны в мутовки по 10–20 в пазухах листьев. Чашечка трубчато-колокольчатая с 5 шиловидно-заострёнными зубцами, коническая, колючая. Венчик длиной до 0,12 см, двугубый, длиннее чашечки, верхняя губа цельнокрайняя, нижняя – трёхлопастная; тычинок 4; завязь нижняя. Стебли, листья, чашечки цветков опушены волосками.

Цвет стеблей с зеленовато-серой, серовато-зелёной, коричневато-зелёной поверхностью, листьев – зелёный, тёмно-зелёный, серовато-зелёный, чашелистиков – зелёный, венчиков – серый, серовато-розовый или розовато-фиолетовый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей, листьев, соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×) видны кусочки стебля, четырёхгранного или (чаще) расщеплённого с опушённой (для пустырника сердечного слабоопушённой) зеленовато-серой,  серовато-зелёной, коричневато-зелёной поверхностью; кусочки листьев – зелёные, тёмно-зелёные, серовато-зелёные, сильно опушённые; цветки или их части: чашечка трубчато-колокольчатая, опушённая, с колючими зубцами, венчик двугубый серый, серовато-розовый или розовато-фиолетовый, опушённый снаружи.

Цвет измельчённого сырья серовато-зелёный, коричневато-зелёный с беловатыми, коричневатыми и тёмно-зелёными вкраплениями. Запах слабый.

Порошок. Кусочки стеблей, цветоносов, листьев и соцветий, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10×) видны кусочки серовато-зелёного стебля, опушённого волосками с поверхности и беловатого или желтовато-белого на изломе; зелёные частицы опушённых листьев и чашечки, фрагменты опушённого серовато-розового или розово-фиолетового венчика.

Цвет порошка от серовато-зелёного до коричневато-зелёного с многочисленными беловатыми, желтовато-белыми, серовато-белыми, розово-фиолетовыми и серовато-розовыми вкраплениями. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности с обеих сторон должны быть видны клетки эпидермиса с тонкими извилистыми боковыми стенками. Многочисленные устьица присутствуют на нижней стороне и сопровождаются 3–4 (редко 2) околоустьичными клетками (аномоцитный тип). На обеих сторонах листа встречаются многочисленные простые многоклеточные волоски с бородавчатой поверхностью, состоящие из 2–5 клеток, расширенные в местах сочленения, и редкие простые одноклеточные волоски, а также головчатые волоски на одно-, двухклеточной короткой ножке с округлой головкой, состоящей из 1–2 клеток. Преимущественно на нижней стороне листа расположены эфирномасличные желёзки, состоящие из 4–6 (реже 8) выделительных клеток на короткой ножке.

Венчик цветка с внешней стороны густо покрыт волосками. Эпидермис верхней губы венчика состоит из клеток удлинённой формы (внешняя сторона) и более мелких клеток изодиаметрической формы (внутренняя сторона) с извилистыми стенками. На внешней стороне верхней губы находятся волоски, простые одноклеточные и многоклеточные, состоящие из 2–6 (реже 8) клеток, с бородавчатой поверхностью, а также головчатые волоски. Присутствуют эфирномасличные желёзки. Большое количество простых одноклеточных и многоклеточных бородавчатых волосков обнаруживается по краю верхней губы. С внутренней стороны встречаются редкие простые одноклеточные и многоклеточные волоски, состоящие из 2–4 клеток, а также головчатые волоски. Эпидермис лопастей нижней губы венчика состоит из клеток изодиаметрической формы с прямыми стенками. На внешней стороне волоски простые одноклеточные, часто изогнутые, многоклеточные – из 2–3 клеток, головчатые волоски и эфирномасличные желёзки. Волоски на внутренней стороне преимущественно простые одноклеточные с бородавчатой поверхностью и головчатые. Около края и по краю нижней губы с обеих сторон волосков и желёзок не обнаруживается. В мезофилле присутствуют мелкие друзы кальция оксалата. Клетки эпидермиса трубки венчика с обеих сторон имеют удлинённую или изодиаметрическую форму и прямые стенки. На внешней стороне трубки представлены простые одноклеточные и многоклеточные волоски, состоящие из 2–3 клеток, часто изогнутых, а также головчатые волоски. Обнаруживаются эфирномасличные желёзки. На внутренней стороне трубки в верхней части присутствуют редкие простые волоски, состоящие из 1–2 клеток, а также головчатые волоски и эфирномасличные желёзки, а в центральной части – значительное количество простых одноклеточных, часто изогнутых тонкостенных волосков.

Клетки эпидермиса чашелистика с 2 сторон имеют удлинённо-вытянутую или изодиаметрическую форму с извилистыми или слабо извилистыми стенками. На внешней стороне присутствуют устьица аномоцитного типа и множество волосков, простых одноклеточных и многоклеточных с бородавчатой поверхностью, а также головчатые волоски. Простые многоклеточные волоски состоят из 2–6 клеток и в значительном количестве обнаруживаются на верхушке чашелистика и по краю зубца; в основании, а также в центральной части и по ходу жилок присутствует большое количество механических волокон. На внутренней стороне чашелистика встречаются волоски, простые бородавчатые одноклеточные и многоклеточные, состоящие из 2–5 клеток, а также головчатые волоски и эфирномасличные желёзки. Пыльца округлая, трёхгранная гладкая трёхбороздная.

При рассмотрении «давленого» микропрепарата препарата цветоножки и стебля хорошо видны клетки эпидермиса изодиаметрической или удлинённо-прямоугольной формы с прямыми стенками; обнаруживаются основные диагностические признаки (тип устьичного аппарата, волоски, эфирномасличные желёзки), характерные для листа пустырника; в состав проводящих пучков входят спиральные, лестничные и сетчатые сосуды.

Порошок. В порошке видны фрагменты эпидермиса с устьицами, простыми одноклеточными и многоклеточными волосками с бородавчатой поверхностью; эфирномасличные желёзки, состоящие из 4–6 выделительных клеток и одноклеточной ножки; пыльца округлая, трёхгранная гладкая трёхбороздная. Обнаруживаются также фрагменты стебля и цветка, содержащие основные диагностические признаки (тип устьичного аппарата, волоски, желёзки), характерные для листа пустырника.

Рисунок 1 – Пустырника трава

1 – фрагмент эпидермиса (нижняя сторона) с извилистыми стенками, устьицами аномоцитного типа, эфирномасличной желёзкой (200×);
2 – простой многоклеточный бородавчатый волосок и головчатый волосок (200×);

3 – фрагмент трубки венчика цветка с простыми одноклеточными тонкостенными волосками (200×); 4 – фрагмент верхней губы венчика цветка: а – простой одноклеточный грубобородавчатый волосок (200×).

 

 

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—уксусная кислота ледяная—этилацетат 5:10:30.

Раствор стандартного образца аукубина. Около 5 мг аукубина растворяют в 5 мл спирта 96 %.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм.

В колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл спирта 50 %, нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температуре 60 °С в течение 30 мин или обрабатывают в УЗ-ванне в течение 15 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования. Растворяют 0,5 г диметиламинобензальдегида в 50 мл смеси хлористоводородная кислота концентрированная—спирт 96 % 1:4.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм, шириной не более 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца аукубина. Пластинку с нанесёнными образцами сушат в течение 10 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение не менее 40 мин и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, нагревают при 100–105 °С в течение 10 мин до появления пятен и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора стандартного образца аукубина должна обнаруживаться зона адсорбции синего или серо-синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции синего или серо-синего цвета ниже и выше зоны адсорбции стандартного образца аукубина; возможно обнаружение дополнительных зон адсорбции серо-синего цвета на уровне зоны стандартного образца аукубина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 6,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3,0 мм, - не более 5 %.

Измельчённое сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, - не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, - не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, - не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Цельное сырьё, измельчённое сырьё - не более 7 %.

Стебли. Цельное сырьё - не более 46 %.

Кусочки стеблей. Измельчённое сырьё - не более 46 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё - не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 1,0 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. В соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 2,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50 мл спирта 70 %, взвешивают с погрешностью ±0,01 г, колбу закрывают пробкой и оставляют на 1 ч. Затем колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают на водяной бане, поддерживая слабое кипение в течение 1 ч. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры, взвешивают, при необходимости доводят её содержимое до первоначальной массы спиртом 70 %. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 25 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96 % до метки.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	A	-	оптическая плотность испытуемого раствора;
	а	-	навеска сырья, г;
	260	-	удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм, 260 ();
	W	-	влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. В соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (методика 1: из навески 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, экстрагент спирт 70 %).

Примечание – Определение суммы флавоноидов в пересчёте на рутин определяют для сырья, предназначенного для получения лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты) и экстракционных лекарственных форм (настойки, экстракты спиртовые); экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом 70 %, определяют для сырья, предназначенного для получения экстракционных лекарственных форм (настойки, экстракты спиртовые).

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».