Варфарин натрия клатрат

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Оксо-3-[(1RS)-3-оксо-1-фенилбутил]-2H-1-бензопиран-4-олят натрия—пропан-2-ол (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % варфарина натрия C₁₉H₁₅NaO₄ в пересчёте на безводное и свободное от 2-пропанола и остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, растворим в ацетоне, очень мало растворим в метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см⁻¹ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца варфарина натрия клатрата.

2. ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 2-пропанола на хроматограмме стандартного раствора (раздел «2-Пропанол»).

3. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной, фильтруют, прибавляют 2 мл калия дихромата раствора 0,5 % и встряхивают в течение 5 мин; через 20 мин должно появиться зеленовато-голубое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 7,6 до 8,6 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Метанол—вода 250:750.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 10:250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг примеси В и 2 мг примеси С, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: 4-гидрокси-2H-1-бензопиран-2-он [1076-38-6].

Примесь С: (3E)-4-фенилбут-3-ен-2-он [1896-62-4].

Хроматографические условия

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Варфарин – 1 (около 9 мин); примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,6. 

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 0,5; примесь С – 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей В и С не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади пика варфарина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

2-Пропанол. От 8,0 до 8,5 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,17 г пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 2,0 мл воды и прибавляют 2,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,17 г 2-пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Хроматографические условия

Хроматографируют контрольный, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. 2-Пропанол – 1; пропанол – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (R_s) между пиками 2-пропанола и пропанола должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (A_s) 2-пропанола должен быть не более 1,3;

- относительные стандартные отклонения площадей пиков 2-пропанола и пропанола должны быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание 2-пропанола в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

Фенольные кетоны. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 2 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 385 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 2 %.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,2.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 308 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 0,01 М.

Содержание варфарина натрия C₁₉H₁₅NaO₄ в процентах (Х) в пересчёте на безводное, свободное от 2-пропанола и остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

*Приводится для информации.