Темозоломид

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Темозоломид		ФС.2.1.0584
Темозоломид
Temozolomidum		Вводится впервые

 

 

C6H6N6O2	М.м. 194,15
[85622-93-1]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3-Метил-4-оксо-3,4-дигидроимидазо[5,1-d][1,2,3,5]тетразин-8-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % темозоломида C₆H₆N₆O₂ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. От белого до светло-розового или светло-коричневого с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилформамиде, мало либо очень мало растворим в воде, практически нерастворим в этаноле 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см⁻¹ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца темозоломида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика темозоломида на хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света. Растворы, содержащие темозоломид и его примеси, не подвергают воздействию ультразвука.

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,2 г натрия гексансульфоната, растворяют в 950 мл воды, прибавляют 20,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят рН раствора уксусной кислотой ледяной до 2,60. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 25:975.

Растворитель. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,2 г натрия гексансульфоната, растворяют в 600 мл воды, прибавляют 250,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят рН раствора уксусной кислотой ледяной до 1,80. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца темозоломида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца темозоломида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца темозоломида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси A (в виде гидрохлорида [72-40-2]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси E. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца 2-азагипоксантина моногидрата [7151-03-3], растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца темозоломида, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси E и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 5-амино-1H-имидазол-4-карбоксамид [360-97-4].

Примесь E (2-азагипоксантин): 3,7-дигидро-4H-имидазо[4,5-d][1,2,3]триазин-4-он [4656-86-4].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 270 нм;
Объём пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Темозоломид – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,5; примесь A – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей Е и А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика темозоломида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками темозоломида и примеси A должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (A_S) темозоломида должен быть не более 1,9;

- относительное стандартное отклонение площади пика темозоломида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 0,4; примесь E – 0,63.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика темозоломида на хроматограмме раствора сравнения;
	a1	-	навеска субстанции, мг;
	a0	-	навеска фармакопейного стандартного образца темозоломида, мг;
	P	-	содержание темозоломида в фармакопейного стандартном образце темозоломида, %.

Допустимое содержание примесей:

- примеси E – не более 0,2 %;

- примеси A – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1%;

- сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси»), и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца темозоломида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида:

- фактор асимметрии пика (A_S) темозоломида должен быть не более 1,9;

- относительное стандартное отклонение площади пика темозоломида должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание темозоломида C₆H₆N₆O₂ в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где	S1	-	площадь пика темозоломида на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика темозоломида на хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида;
	a1	-	навеска субстанции, мг;
	a0	-	навеска фармакопейного стандартного образца темозоломида, мг;
	W	-	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	-	содержание темозоломида в фармакопейного стандартном образце темозоломида, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

 

*Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.