Ламивудин

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Ламивудин		ФС.2.1.0439
Ламивудин
Lamivudinum		Вводится впервые

 

 

C8H11N3O3S	М.м. 229,26
[134678-17-4]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-Амино-1-[(2R,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил] пиримидин-2(1H)-он.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % ламивудина C₈H₁₁N₃O₃S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

*Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ламивудина.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ламивудина на хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От –97,0 до –99,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 5 % раствора субстанции, измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 4 см, не должна превышать 0,0015 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (Примесь D). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,7 г аммония ацетата, растворяют в 900 мл воды и доводят обьём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор аммония ацетата 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примесь D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D: 4-Амино-1-[(2S,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он [134680-32-3].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель β-циклодекстрин деривативный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	15–30 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 270 нм;
Объём пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	двухкратное от времени удерживания пика ламивудина.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ламивудин – 1 (около 8 минут); примесь D – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы: отношение максимум/минимум (p/v) между пиками ламивудина и примеси D должно быть не менее 15.

Допустимое содержание примеси D. Не более 0,3 %. Содержание примеси D в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Вычисляется сумма площадей пиков в процентах только примесей с относительным временем удерживания от 1,2 до 1,5, за вычетом процентного содержания примеси В, полученного в испытании «Родственные примеси».

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,9 г аммония ацетата в 900 мл воды, доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 3,8, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол – буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) салициловой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) цитозина и 5 мг (точная навеска) урацила, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащей примеси А и В, растворяют в 2,0 мл ПФ, добавляют 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: rac-(2R,5S)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2H)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоновая кислота [173602-25-0].

Примесь В: 4-амино-1-[(2R,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он, CAS 139757-68-9 и 4-амино-1-[(2S,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он [136846-20-3].

Примесь С (салициловая кислота): 2-Гидроксибензойная кислота [69-72-7].

Примесь Е (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1H)-он [71-30-7].

Примесь F (урацил): Пиримидин-2,4(1H,3H)-дион [66-22-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	35 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 277 нм;
Объём пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика ламивудина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси С и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ламивудин – 1 (около 8 минут); примесь Е – около 0,28; примесь F – около 0,32;. примесь A – около 0,36; примесь B – около 0,91; примесь J – около 1,45; примесь C – около 2,32.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, E и F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (R_s) между пиками примесей F и A должно быть не менее 1,5;

- разрешение (R_s) между пиками примеси В и ламивудина должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие коэффициенты: примесь Е – 0,6; примесь F – 2,2; примесь J – 2,2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать двукратную площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должны превышать площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ламивудина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ламивудина и испытуемый раствор.

Содержание ламивудина C₈H₁₁N₃O₃S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	-	площадь пика ламивудина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина;
	а1	-	навеска субстанции, мг;
	а0	-	навеска фармакопейного стандартного образца ламивудина, мг;
	W	-	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	-	содержание ламивудина в фармакопейном стандартном образце ламивудина, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.