Кабозантиниба (S)-малат

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Кабозантиниба (S)-малат		ФС.2.1.0427
Кабозантиниб
Cabozantinibi (S)-malas		Вводится впервые

 

 

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

N-{4-[(6,7-Диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(4-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид—(2S)-2-гидроксибутандиовая кислота (1:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % кабозантиниба (S)-малата C₂₈H₂₄FN₃O₅·C₄H₆O₅ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

 

Кабозантиниба (S)-малат и его примеси являются высокотоксичными веществами. Необходимо принять меры для исключения возможности их вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

 

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика кабозантиниба на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси

Растворы, содержащие кабозантиниба (S)-малата и его примеси, хранят в защищённом от света месте при температуре 5 °С.

Сумма примесей 2 и 3 – не более 0,0013 %.

1. Примеси 1 и 2. Примесь 1 – не более 0,0019 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2 растворяют в 20 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор В. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Д. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл калибровочного раствора Г и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Е. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Ж. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки

Примечание

Примесь 1: 6,7-диметоксихинолин-4-ол [127285-54-5].

Примесь 2: 4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]анилин [190728-25-7].

Хроматографические условия

Колонка	100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %;
Температура колонки	25 °С;
Температура образца	5 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	масс-спектрометрический;
Объём пробы	10 мкл;
Тип ионизации	электроспрей (ESI);
Режим электрораспыления	положительный (ESI+);
Рабочий режим	мониторинг множественных реакций (MRM);
Напряжение на капилляре	+3,5 кВ;
Напряжение на конусе	80 В;
Температура источников ионов	120 °С;
Температура испарения	450 °С;
Расход газа-распылителя	575 л/ч;
Расход газа в конусе	70 л/ч;
Деление потока	0,2 мл/мин.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–5	97 → 30	3 → 70
5–5,5	30 → 0	70 → 100
5,5–6,5	0	100
6,5–7	0 → 97	100 → 3
7–10	97	3

Переходы сканирования масс и энергии столкновений

Компонент	Время удерживания	Переходы сканирования масс, Да	Энергия столкновений, эВ
Примесь 1	около 3,0 мин	206,00 ® 190,00	28
Примесь 2	около 4,9 мин	297,00 ® 281,00	28

Хроматографируют калибровочные растворы А – Ж и испытуемый раствор.

Строят калибровочный график зависимости площадей пиков S_i примесей 1 и 2 от концентрации примесей 1 и 2. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,0075 мкг/мл и примеси 2 0,005 мкг/мл отношение сигнал/шум (S/N) для пиков примесей 1 и 2 должно быть не менее 10.

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,1125 мкг/мл и примеси 2 0,075 мкг/мл относительное стандартное отклонение площади пиков примесей 1 и 2 должно быть не более 10,0 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примесей 1 и 2 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примесей 1 и 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	C	–	концентрация примесей 1 и 2 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	P	–	содержание основного вещества в примесях 1 и 2 соответственно, %.

2. Примесь 3. Не более – 0,0013 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 125 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор запрещается обрабатывать ультразвуком!

Раствор примеси 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) 4-фторанилина (примесь 3 [371-40-4]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 3 6,0 мл, 4,0 мл и 2,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %;
Температура колонки	25 °С;
Температура образца	5 °С;
Скорость потока	1,2 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм;
Объём пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–8	95 → 55	5 → 45
8–15	55 → 45	45 → 55
15–20	45 → 0	55 → 100
20–21	0	100
21–23	0 → 95	100 → 5
23–28	95	5

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 3 – около 0,46.

Строят калибровочный график зависимости площади пика S_i примеси 3 от концентрации примеси 3. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы. Относительное стандартное отклонение площади пика примеси 3 при концентрации 125 мкг/мл должно быть не более 20 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 3 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 3 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	C	–	концентрация примеси 3 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	P	–	содержание основного вещества в примеси 3, %.

3. Примесь 4. Не более – 0,0014 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 3:300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил 20:1000.

Растворитель. Растворяют 100 мг аскорбиновой кислоты в 500 мл воды, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и 500 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 45 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси 4. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) 4-аминофенола (примесь 4 [123-30-8]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 9,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 4 5,0 мл, 10,0 мл и 15,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ; 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Температура образца	5 °С;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический (диодно-матричный), 192 нм;
Объём пробы	100 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–6,5	100	0
6,5–6,6	100 → 5	0 → 95
6,6–25	5	95
25–25,1	5 → 100	95 → 0
25,1–33	100	0

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 10 мин); примесь 4 – около 0,53.

Строят калибровочный график зависимости площади пика S_i примеси 4 от концентрации примеси 4. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией 0,0225 мкг/мл:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 4 должно быть не менее 10;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси 4 должно быть не более 10,0 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 4 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 4 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	C	–	концентрация примеси 4 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	P	–	содержание основного вещества в примеси 4, %.

4. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения «Родственные примеси. Примесь 2» со следующими изменениями.

Растворитель. Вода—метанол—диметилсульфоксид 100:400:500.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Примечание

Примесь 5: N-{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(2-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид.

Примесь 6: 1-N,1- Nʹ-бис{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}циклопропан-1,1-дикарбоксамид [2439164-91-5].

Хроматографические условия

Температура образца	25 °С;
Объём пробы	5 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 6 – около 0,97; примесь 5 – около 1,03.

**Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кабозантиниба должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 5–1,27; примесь 6–1,45.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 6 – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,15 %;

- сумма примесей – не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,18 г (точная навеска) субстанции, в качестве растворителя, 3 мл диметилацетамида.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и испытуемый раствор Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата:

- фактор асимметрии пика (A_S) кабозантиниба должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика кабозантиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание кабозантиниба (S)-малата C₂₈H₂₄FN₃O₅·C₄H₆O₅ в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата ;
	а1	–	навеска субстанции, мг;
	а0	–	навеска фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, мг;
	P	–	содержание кабозантиниба (S)-малата в стандартном образце кабозантиниба (S)-малата, %;
	W	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации

**Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.