МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
|
Бупивакаина
гидрохлорид моногидрат
|
|
ФС.2.1.0671
|
|
Бупивакаин
|
|
|
|
Bupivacaini hydrochloridum monohydricum
|
|
Вводится
впервые
|
|
|
|
C18H28N2O·HCl·H2O
|
М.м. 342,90
|
|
[73360-54-0]
|
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(2RS)-1-Бутил-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамида
гидрохлорид моногидрат.
Cодержит
не менее 98,5 % и не более 101,0 % бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl в пересчёте
на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание.
Белый
или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.
Растворимость.
Легко
растворим в спирте 96 %, растворим в воде, мало растворим в хлороформе.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия
(ОФС«Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции
по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца
бупивакаина гидрохлорида.
2. Тонкослойная хроматография.
Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора
по положению, величине и окраске должна соответствовать
зоне адсорбции бупивакаина на хроматограмме раствора стандартного
образца бупивакаина.
Пластинка.
ТСХ пластинка
со слоем силикагеля G.
Подвижная фаза (ПФ). Аммиака
раствор концентрированный 25 %—метанол 0,1:100.
Испытуемый
раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл
помещают 25 мг
субстанции,
растворяют в метаноле и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.
Раствор
стандартного
образца бупивакаина. В мерную колбу
вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного
стандартного
образца бупивакаина, растворяют в метаноле
и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.
Реактив для детектирования.
Калия
йодовисмутата раствор разведённый.
На линию старта пластинки наносят по 5 мкл
испытуемого раствора и раствора стандартного
образца бупивакаина Пластинку с нанесёнными пробами сушат
на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют
восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки
от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до
удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для
детектирования и просматривают в видимом свете.
3. Качественная
реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на
хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Угол вращения.
От –0,10° до +0,10° в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции
в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора.
Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС«Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность
раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).
Кислотность
или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в
испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида
раствора 0,01 М; рН полученного раствора должен быть не менее 4,7.
К
полученному раствору прибавляют 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора
0,01 М; рН полученного раствора должен быть не более 4,7.
Родственные примеси
1. Примесь F.
Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все
растворы используют свежеприготовленными.
Подвижная
фаза А (ПФА). Растворяют 0,23 г
натрия дигидрофосфата моногидрата и 3,626 г
динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение рН
раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором
10 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Смешивают равные объёмы полученного раствора и ацетонитрила.
Подвижная
фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Испытуемый
раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг
субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор
стандартного образца примеси F.
В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного
стандартного образца примеси F,
растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор
для проверки разделительной способности хроматографической системы. В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного
стандартного образца примеси F
и 20 мг метилбензоата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до
метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
ПФА до метки.
Примечание
Примесь F:
2,6-Диметиланилин [87-62-7].
Хроматографические
условия
|
Колонка
|
250 × 4,6 мм, силикагель
октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии,
5 мкм;
|
|
Температура
колонки
|
30 °С;
|
|
Скорость
потока
|
1,0 мл/мин;
|
|
Детектор
|
спектрофотометрический,
240 нм;
|
|
Объём пробы
|
50 мкл.
|
Режим
хроматографирования
|
Время,
мин
|
ПФА,
%
|
ПФБ,
%
|
|
0–10
|
100
|
0
|
|
10–15
|
100 → 80
|
0 → 20
|
|
15–25
|
80
|
20
|
|
25–28
|
80 →100
|
20 → 0
|
|
28–30
|
100
|
0
|
Хроматографируют
раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы,
раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около 20 мин); примесь F – около 0,3; метилбензоат – около 0,4.
Пригодность
хроматографической системы. На хроматограмме
раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs)
между пиками примеси F
и метилбензоата должно быть не менее 4,0.
На
хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:
- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее
40;
Допустимое содержание примесей.
На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать площадь
основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F (не более 0,001 %).
2. Другие
примеси. Определение проводят
методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).
Раствор внутреннего стандарта. В
мерную колбу вместимостью 500 мл помещают около 25 мг
метилбегената, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.
Испытуемый раствор. Растворяют
около 50 мг субстанции в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл натрия
гидроксида раствора 2 М и дважды экстрагируют порциями раствора
внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют
и фильтруют.
Раствор
сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора раствором
внутреннего стандарта до метки.
Раствор
сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора
раствором внутреннего стандарта до метки.
Раствор
сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора
раствором внутреннего стандарта до метки.
Раствор
для проверки пригодности хроматографической системы.
Растворяют 10 мг субстанции, 10 мг фармакопейного стандартного образца
примеси В и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е в
2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл раствора
натрия гидроксида 10 % и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего
стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют. Полученный
фильтрат помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объём
раствора раствором внутреннего стандарта до метки.
Примечание
Примесь
В: (2RS)-N-(2,6-Диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид
[15883-20-2].
Примесь
Е: 6-(Бутиламино)-N-(2,6-диметилфенил)гексанамид [1330172-81-0].
Хроматографические условия
|
Колонка
|
кварцевая
капиллярная, 30 м ´ 0,32 мм,
покрытая слоем полиметилфенилсилоксилана, 0,25 мкм;
|
|
Детектор
|
пламенно-ионизационный;
|
|
Газ-носитель
|
гелий для хроматографии;
|
|
Деление потока
|
1:12;
|
|
Скорость потока
|
2,5 мл/мин;
|
|
Объём пробы
|
1 мкл;
|
Температурная
программа
|
|
Время, мин
|
Температура, °C
|
|
Колонка
|
0
|
180
|
|
0–10
|
180 → 230
|
|
10–15
|
230
|
|
Инжектор
|
|
250
|
|
Детектор
|
|
250
|
Хроматографируют
раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор.
Относительное
время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около
10 мин); примесь В – около 0,7; примесь Е – около 1,1; внутренний стандарт
– около 1,4.
Пригодность
хроматографической системы. На хроматограмме
раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
- разрешение (Rs) между пиками бупивакаина и примеси Е
должно быть не менее 3,0;
Допустимое содержание
примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- отношение
площадей пиков примеси В и внутреннего стандарта должно быть не более отношения
площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора
сравнения Б (не более 0,5 %);
- отношение
площадей пиков любой другой примеси и внутреннего стандарта должно быть не
более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на
хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,1 %);
- отношение
суммы площадей пиков примесей и внутреннего стандарта должно быть не более
отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме
раствора сравнения А (не более 1,0 %).
Не
учитывают примеси, для которых отношение площади пика к площади внутреннего
стандарта меньше отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта
на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).
Вода.
Не
менее 4,0 % и не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1).
Сульфатная
зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более
0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 5) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола».
Остаточные
органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные
эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ
на 1 мг бупивакаина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая
чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом
титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,25 г (точная навеска)
субстанции в смеси 20 мл воды и 25 мл спирта 96 %, прибавляют
5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М
раствором натрия гидроксида этанольным.
Конечную точку титрования
определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают
расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.
Параллельно проводят контрольный
опыт.
1 мл 0,1 М раствора
натрия гидроксида этанольного соответствует
32,49 мг бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl.
ХРАНЕНИЕ
В хорошо укупоренной упаковке,
в защищённом от света месте.