Адеметионина бутандисульфонат

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Адеметионина бутандисульфонат		ФС.2.1.0334
Адеметионин
Ademetionini butandisulfonas		Вводится впервые

 

 

C15H22N6O5S·1,65C4H10O6S2	М.м. 758,55

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-Амино-4-({[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-амино-9H-пурин-9-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил}(метил)сульфанийил)бутаноат—бутан-1,4-дисульфоновая кислота (1:1,65).

Содержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % адеметионина бутандисульфоната C₁₅H₂₂N₆O₅S·1,65C₄H₁₀O₆S₂ в пересчёте на безводное вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок с характерным запахом.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в формамиде, практически нерастворим в спирте 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика адеметионина на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната (раздел «Количественное определение»).

3. Ионообменная хроматография (ОФС «Ионообменная хроматография»). Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца динатрия бутандисульфоната.

Все растворы хранят при температуре 5 ºС и используются свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 191 мг натрия карбоната безводного, 143 мг натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг фармакопейного стандартного образца динатрия бутандисульфоната, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 37 мг натрия сульфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 мл полученного раствора и доводят объём раствора стандартным раствором до метки.

Хроматографические условия

Предколонка	10 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии на основе поливинилового спирта, 9 мкм;
Колонка	250 × 4,0 мм, анионообменная смола для хроматографии на основе поливинилового спирта; 9 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	кондуктометрический;
Объём пробы	25 мкл;
Время хроматографирования	1,5-кратное от времени удерживания пика основного вещества.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. 1,4-бутансульфонат –1 (около 13 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R) между пиками 1,4-бутансульфоната и сульфат-иона должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) 1,4-бутансульфоната должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты должно быть не более 3,0 % (6 введений).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 1,52 г субстанции в 10 мл L-лизина растворе 6,8 % должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

L-Лизина раствор 6,8 %. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,4 г L-лизина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y₄ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 1,0 до 3,0 (0,4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

S,S-Изомер адеметионина. Не менее 55 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 189,2 г аммония формиата в 700 мл воды, доводят значение рН раствора муравьиной кислотой безводной до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока	0,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 260 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	1,5-кратное от времени удерживания пика S,S-изомера адеметионина.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. S,S-изомер адеметионина – 1 (около 19 мин); R,S-изомер адеметионина – около 1,15.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками S,S- и R,S-изомеров адеметионина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (A_S) S,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- фактор асимметрии пика (A_S) R,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика S,S-изомера адеметионина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание S,S-изомера адеметионина в препарате в процентах (Хi) вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте при температуре
2–8 °С и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 12,612 г аммония формиата и 1,0 г натрия октансульфоната в 700 мл воды, доводят значение рН раствора муравьиной кислотой безводной до 2,8. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 5:250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца аденина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аденина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор метилтиоаденозина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) метилтиоаденозина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, 1,0 мл раствора стандартного образца аденина, 1,0 мл раствора стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, 4,0 мл раствора метилтиоаденозина и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 260 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	5-кратное от времени удерживания основного вещества.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Адеметионин – 1; аденин – около 0,67; S-аденозил-L-гомоцистеин – около 0,74; метилтиоаденозин – около 2,0; S-аденозилметионинамин – около 3,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика адеметионина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (R_S) между пиками аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание метилтиоаденозина в субстанции в процентах ( в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме стандартного раствора;
	а1	-	навеска субстанции, мг;
	а0	-	навеска фармакопейного стандартного образца метилтиоаденозина, мг;
	P	-	содержание метилтиоаденозина в фармакопейном стандартном образце метилтиоаденозина, %.
	W	-	содержание воды в субстанции, %;

Содержание аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина в субстанции в процентах ( в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме стандартного раствора;
	а1	-	навеска субстанции, мг;
	а0	-	навеска фармакопейного стандартного образца аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина, соответственно, мг;
	P	-	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце соответствующей примеси, %;
	W	-	содержание воды в субстанции, %.

Содержание S-аденозилметионинамина и любой другой примеси в субстанции в процентах ( в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика S-аденозилметионинамина или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика адеметионина на хроматограмме стандартного раствора;
	а1	-	навеска субстанции, мг;
	а0	-	навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;
	P	-	содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната, %;
	W	-	содержание воды в субстанции, %.

Допустимое содержание примесей:

- S-аденозил-L-гомоцистеин – не более 0,5 %;

- метилтиоаденозин – не более 2,0 %;

- S-аденозилметионинамин – не более 1,75 %;

- аденин – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 5,0 %.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь формамид—метанол 1:1.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг адеметионина 1,4-бутандисульфоната (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими уточнениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната:

- фактор асимметрии пика (A_S) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание адеметионина бутандисульфоната C₁₅H₂₂N₆O₅S·1,65C₄H₁₀O₆S₂ в субстанции в пересчёте на безводное вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната;
	а1	-	навеска субстанции, мг;
	а0	-	навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;
	P	-	содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната, %;
	W	-	содержание воды в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, при температуре 2–8 °С.

 

*Приводится для информации.

**Проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.