Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для  определения содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье, фармацевтических субстанциях растительного происхождения и лекарственных препаратах растительного происхождения, в т. ч. лекарственных растительных препаратах.

Определение содержания дубильных веществ проводят  титриметрическим (метод 1. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на танин) и спектрофотометрическими методами (метод 2. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол и метод 3. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол или (+)-катехин).

Метод 1

В коническую колбу вместимостью 500 мл, помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 2 мм, добавляют 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы испытуемого образца не попали в колбу, доводят объём раствора водой до метки.

В коническую колбу вместимостью 1000 мл помещают 25,0 мл полученного водного извлечения или точный объём экстракта жидкого или настойки, указанный в фармакопейной статье, прибавляют 500 мл воды, 25 мл индигокармина раствора 0,1% и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт: в коническую колбу вместимостью 1000 мл помещают 525 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-жёлтого окрашивания.

1 мл калия перманганата раствора 0,02 М соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчёте на танин.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчёте на танин в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле:

Метод 2.

Пробоподготовка

1. Для лекарственного растительного сырья и лекарственного растительного препарата. Точную навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, измельчённую до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм, помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 150 мл воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин, затем охлаждают под проточной водой до комнатной температуры и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл. Круглодонную колбу ополаскивают водой, промывные воды переносят в мерную колбу с экстрактом, доводят объём водой до метки. После осаждения твёрдых частиц полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата.

Определение проводят в защищённом от света месте.

2. Для экстракта жидкого или настойки. Точный объём экстракта жидкого или настойки, указанный в фармакопейной статье, помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата. 

Методика

Определение суммы дубильных веществ. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива и 10 мл воды, доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (испытуемый раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора (А₁) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Определение суммы дубильных веществ, не адсорбируемых кожным порошком. К 10,0 мл фильтрата прибавляют 0,1 г стандартного образца кожного порошка, перемешивают полученную смесь в течение 1 ч и фильтруют через фильтр беззольный. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива, 10 мл воды и доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (испытуемый раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора (А₂) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность стандартного раствора.

Раствор стандартного образца пирогаллола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пирогаллола, растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца пирогаллола, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива, 10 мл воды и доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (стандартный раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность стандартного раствора (А₃) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле:

Метод 3.

В коническую колбу вместимостью 500 мл помещают 2,0 г (точная навеска), если иное не указано в фармакопейной статье, измельченного испытуемого образца, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, заливают 250 мл воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы испытуемого образца не попали в колбу и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора А (А₁) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 1,0 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Раствор Б. К 5,0 мл фильтрата прибавляют 0,05 г кожного порошка, перемешивают полученную смесь в течение 30 мин и фильтруют через бумажный фильтр диаметром около 125 мм. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора Б (А₂) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Раствор стандартного образца. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пирогаллола (для гидролизуемых дубильных веществ) или ((+)-катехина (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным. Измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца (А₃) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчете на пирогаллол или (+)-катехин в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле: