Настоящая фармакопейная статья распространяется на препараты антитромбина III человека, полученные из плазмы крови человека для фракционирования.

Антитромбин III человека представляет собой гликопротеиновую фракцию плазмы крови человека, обладающую способностью инактивировать тромбин в присутствии избытка гепарина.

Препараты антитромбина III человека не содержат консерванты и антибиотики.

Производство

Для производства препаратов антитромбина III человека используют плазму крови здоровых доноров, соответствующую требованиям ФС "Плазма человека для фракционирования".

Испытания

Описание. Аморфная гигроскопичная масса или порошка белого или бледно-желтого цвета (если в нормативной документации нет других указаний). Определение проводят визуально.

Восстановленный раствор. Прозрачный или слегка опалесцирующий бесцветный или светло-желтой окраски раствор. Определение проводят визуально.

Подлинность

Видоспецифичность. Подтверждается наличием белков только сыворотки крови человека. Испытание проводят методом иммуноэлектрофореза в геле с использованием сывороток против белков сыворотки крови человека, крупного рогатого скота, лошади и свиньи в соответствии с ОФС "Иммуноэлектрофорез в агаровом геле". Допустимо проведение испытания методом иммунодиффузии в геле в соответствии с ОФС "Иммунодиффузия в геле". В результате испытания должны выявляться линии преципитации только с сывороткой против белков сыворотки крови человека.

Антитромбин III. Подтверждается наличием активности антитромбина III. Испытание проводят хромогенным методом в соответствии с ОФС "Определение активности факторов свертывания крови".

Время получения восстановленного препарата. Не более 10 мин (если в нормативной документации нет иных указаний). Приводят описание методики с указанием применяемого растворителя, его объема и условий растворения (температура растворителя, необходимость перемешивания и др.).

Вода. Не более 2,0%. Определение проводят методом К.Фишера в соответствии с ОФС "Определение воды" (если в нормативной документации нет иных указаний). Метод определения и необходимое для испытаний количество образца указывают в нормативной документации.

Механические включения. Видимые механические включения должны соответствовать требованиям ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах".

рН. От 6,0 до 7,5. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия".

Осмоляльность. Не менее 240 мОсм/кг. Определение проводят в соответствии с ОФС "Осмолярность".

Белок. Количественное содержание белка в расчете на 1 флакон или 1 мл восстановленного раствора указывают в нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение белка" любым подходящим методом.

Гепарин. Не более 0,1 МЕ на 1 МЕ антитромбина III. Определение проводят хромогенным методом в соответствии с ОФС "Определение активности факторов свертывания крови". Методика должна быть валидирована для конкретного препарата с учетом влияния антитромбина III на результат определения.

Активность антитромбина III человека. Не менее 25 МЕ на 1 мл восстановленного препарата. Определение проводят хромогенным методом в соответствии с ОФС "Определение активности факторов свертывания крови".

Специфическая активность. Должна составлять не менее 3 МЕ на мг белка (при отсутствии стабилизаторов белковой природы).

Специфическую активность препарата в МЕ на мг белка рассчитывают по формуле:

.

Стабилизатор(ы) (альбумин, натрия цитрат, гепарин и др). Проводят количественное определение вносимого(ых) в препарат стабилизатора(ов) в соответствии с ОФС "Газовая хроматография" и/или ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", если в нормативной документации нет других указаний.

Допустимый предел содержания стабилизатора(ов) должен быть указан в нормативной документации.

Вирусинактивирующие агенты. Проводят количественное определение остаточного содержания в препарате вирусинактивирующего(их) агента(ов) в соответствии с ОФС "Газовая хроматография" и/или ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", если в нормативной документации нет других указаний. Допустимый предел содержания вирусинактивирующего(их) агента(ов) должен быть указан в нормативной документации.

Стерильность. Препарат должен быть стерильным. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Стерильность".

Пирогенность или бактериальные эндотоксины. Должен быть апирогенным или содержать бактериальные эндотоксины в количестве менее 0,1 ЕЭ на 1 МЕ антитромбина III.

Испытание проводят в соответствии с ОФС "Пирогенность" (не менее 50 МЕ антитромбина III на 1 кг массы животного; объем вводимого препарата не должен превышать 10 мл на 1 кг массы животного) или с ОФС "Бактериальные эндотоксины" методом, указанным в нормативной документации.

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg). Препарат не должен содержать поверхностного антигена вируса гепатита В. Определение проводят иммуноферментным методом с использованием тест-систем, разрешенных к применению в практике здравоохранения России и имеющих чувствительность не ниже 0,1 МЕ/мл в соответствии с инструкциями по применению.

Антитела к вирусу гепатита С. Антитела к вирусу гепатита С должны отсутствовать. Определение проводят иммуноферментным методом с использованием тест-систем, разрешенных к применению в практике здравоохранения России и имеющих 100% чувствительность и специфичность в соответствии с инструкциями по применению.

Антитела к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) и антиген р24 ВИЧ-1. Препарат не должен содержать антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) и антиген р24 ВИЧ-1. Определение проводят иммуноферментным методом с использованием тест-систем, разрешенных к применению в практике здравоохранения России и имеющих 100% чувствительность и специфичность в соответствии с инструкциями по применению.

Упаковка и маркировка. В соответствии ОФС "Лекарственные препараты из плазмы крови человека".

Транспортирование и хранение. В соответствии с ОФС "Лекарственные препараты из плазмы крови человека" в защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С. Замораживание не допускается.