Ампициллин натрия+Оксациллин натрия, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Ампициллин натрия+Оксациллин натрия, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения		ФС.3.1.0115.22
Ампициллин+Оксациллин, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения
Ampicillinum natricum+Oxacillinum natricum, pulvis pro solutione pro injectione intravenosa et intramusculari		Вводится впервые

 

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат ампициллин натрия+оксациллин натрия, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Порошки», ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения» и нижеприведённым требованиям.

Содержит ампициллин натрия C₁₆H₁₈N₃NaO₄S в количестве, эквивалентном не менее 90,0 % и не более 115,0 % от заявленного количества ампициллина C₁₆H₁₉N₃O₄S.

Содержит оксациллин натрия C₁₉H₁₈N₃NaO₅S в количестве, эквивалентном не менее 90,0 % и не более 115,0 % от заявленного количества оксациллина C₁₉H₁₉N₃O₅S.

 

Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Порошки».

Подлинность

1. ВЭЖХ. Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков ампициллина и оксациллина на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. Препарат должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).

Цветность раствора. Оптическая плотность препарата, измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 430 нм, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH. От 7,0 до 10,0 (10 % раствор препарата в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Время растворения. В соответствии с ОФС «Время растворения». К содержимому флакона прибавляют указанное в прилагаемой инструкции по медицинскому применению препарата количество растворителя и непрерывно встряхивают до полного растворения. Визуально определяют время, за которое произошло полное растворение содержимого флакона.

Механические включения

Видимые. В соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Невидимые. В соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».

Светопоглощающие примеси. Не более 0,3. Определение проводят методом спектрофотометрии (1 % раствор препарата в воде, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примеси ампициллина

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,0 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, 100 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 100 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,0 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, 100 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 800 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор Б—раствор А 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску порошка, соответствующую около 0,107 г ампициллина, растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 10 мг (точная навеска) стандартного образца ампициллина, растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором А до метки.

Раствор стандартного образца оксациллина натрия. Растворяют 2 мг стандартного образца оксациллина натрия в 1 мл раствора А.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг стандартного образца ампициллина и 1 мг стандартного образца цефрадина ((6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(циклогекса-1,4-диен-1-ил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 38821-53-3), растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. 

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ампициллина и доводят объём раствора раствором А до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором А до метки.

Хроматографические условия

Колонка		250 × 4,6 мм, cиликагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки		21,5±3,5 °C;
Скорость потока		1,0 мл/мин;
Детектор		спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы		50 мкл;
Время регистрации хроматограммы		3-кратное кратное от времени удерживания пика ампициллина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца оксациллина натрия, раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.

Время удерживания ампициллина – около 9 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ампициллина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками цефрадина и ампициллина  должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина:

- фактор асимметрии пика (A_S) ампициллина должен быть не менее 0,8 и не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ампициллина, должна составлять не менее 1100 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (не более 2,0 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (не более 5,0 %).

Не учитывают пик оксациллина и пики примесей, площадь которых менее площади ампициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

2. Примеси оксациллина

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 6,0 г натрия дигидрофосфата моногидрата, 0,56 г натрия гексансульфоната моногидрата и 50 мг натрия эдетата дигидрата в 800 мл воды и доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,1±0,1. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску порошка, соответствующую около 53 мг оксациллина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца оксациллина натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10,6 мг (точная навеска) стандартного образца оксациллина натрия, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг стандартного образца примеси E, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 10,6 мг стандартного образца оксациллина натрия и доводят объём раствора растворителем до метки. 

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца оксациллина натрия и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1: (3S,7R,7aR)-2,2-диметил-5-(5-метил-3-фенилизоксазол-4-ил)-2,3,7,7a-тетрагидроимидазо[5,1-b]тиазол-3,7-дикарбоновая кислота.

Примесь A: (2S,5R,6R)-6-амино-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота, CAS 551-16-6  

Примесь B: (4S)-2-[карбокси(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота.

Примесь С: 5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоновая кислота, CAS 1136-45-4.

Примесь D: (4S)-2-[(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота, CAS 1642559-63-4

Примесь E: (2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-[5-ме­тил-3-(2-хлорфенил)-1,2-­оксазол-4-кар­боксами­до]-7-ок­со-4-тиа-1-аза­би­цик­ло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота, CAS 61-72-3

Примесь F: (2R,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-кар­боксами­до)-7-ок­со-4-тиа-1-аза­би­цик­ло[3.2.0]геп­тан-2-кар­ботионовая кислота­, CAS 5053-35-0

Примесь G: (2S,5R,6R)-3,3-ди­ме­тил-6-[5-метил-3-(хлорфенил)-1,2-окс­азол-4-кар­боксами­до]-7-ок­со-4-тиа-1-аза­би­цик­ло[3.2.0]геп­тан-2-карбоновая кислота.

Примесь I: (2S,5R,6R)-6-[(2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Примесь J: (2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-[(2R,4S)-4-карбокси-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-2-ил]-2-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка		250 × 4,6 мм, cиликагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки		22 °C;
Скорость потока		1,5 мл/мин;
Детектор		спектрофотометрический, 225 нм;
Объём пробы		10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–3	90	10
3–30	90 → 50	10 → 50
30–40	50 → 15	50 → 85
40–45	15	85
45–50	15 → 90	85 → 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца оксациллина натрия и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Оксациллин – 1 (около 19 мин); примесь A – 0,08; примеси B изомер 1 – 0,66; примесь 1 – 0,68; примеси В изомер 2 – 0,69; примеси D изомер 1 – 0,83; примеси D изомер 2 – 0,84; примесь F – 0,93; примесь C – 0,95; примесь E – 1,09; примесь G – 1,17; примесь I – 1,19; примесь J – 1,31.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика оксациллина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками оксациллина и примеси E  должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия:

- фактор асимметрии пика (A_S) оксациллина должен быть не менее 0,8 и не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади пика оксациллина должно быть не более 2,5 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ампициллина, должна составлять не менее 10000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 4,5; примесь B – 2,5; примесь C – 0,5; примесь D – 1,27.

Содержание любой примеси оксациллина в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	-	площадь пика любой примеси оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	-	площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия;
	a1	-	навеска порошка, мг;
	a0	-	навеска стандартного образца оксациллина натрия, мг;
	P	-	содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,5 %;

- примесь A – не более 0,5 %;

- примесь B – не более 1,5 %;

- примесь C – не более 0,5 %;

- примесь D – не более 0,5 %;

- примесь E – не более 1,0 %;

- примесь F – не более 0,5 %;

- примесь G – не более 0,5 %;

- примесь I – не более 0,5 %;

- примесь J – не более 0,7 %;

- любая другая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей оксациллина – не более 3,0 %.

Не учитывают пик ампициллина и его примеси с относительным временем удерживания по пику оксациллина 0,2; 0,42; 0,51; 0,58; 0,72 и 0,98, а также пики примесей, площадь которых менее площади оксациллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 60 мг (точная навеска) препарата.

Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» (способ 1 или способ 2). При использовании способа 1 определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Количественное определение».

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают содержимое одного флакона, прибавляют 30 мл воды, встряхивают до полного растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют.

Стандартный раствор. Растворяют в воде точные навески стандартных образцов ампициллина тригидрата и оксациллина натрия с получением концентраций, эквивалентных ожидаемым концентрациям ампициллина и оксациллина в испытуемом растворе.

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Содержание ампициллина C₁₆H₁₉N₃O₄S в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика ампициллина на хроматограмме стандартного раствора;
	С0	–	концентрация стандартного образца ампициллина тригидрата в стандартном растворе, мг/мл;
	P	–	содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина тригидрата, %;
	L	–	заявленное количество ампициллина в одном флаконе, мг.

Содержание оксациллина C₁₉H₁₉N₃O₅S в препарате в процентах от заявленного количества (Y) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика оксациллина на хроматограмме стандартного раствора;
	С0	–	концентрация стандартного образца оксациллина натрия в стандартном растворе, мг/мл;
	P	–	содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;
	L	–	заявленное количество оксациллина в одном флаконе, мг;
	401,4	–	молекулярная масса оксациллина;
	423,4	–	молекулярная масса оксациллина натрия.

Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 15 мг суммы ампициллина и оксациллина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,07 ЕЭ на 1 мг суммы ампициллина и оксациллина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Стерильность»).

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Аммония ацетата раствор 0,2 М. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 7,7 г аммония ацетата, растворяют в 300 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—аммония ацетата раствор 0,2 М 80:150:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску препарата, соответствующую около 37,5 мг ампициллина, прибавляют 40 мл ПФ, встряхивают до полного растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют.

Стандартный раствор. Растворяют в воде точные навески стандартных образцов ампициллина тригидрата и оксациллина натрия с получением концентраций, эквивалентных ожидаемым концентрациям ампициллина и оксациллина в испытуемом растворе.

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 232 нм;
Объем пробы	10 мкл;

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (R_S) между пиками ампициллина и оксациллина должно быть не менее 6,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика оксациллина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание ампициллина C₁₆H₁₉N₃O₄S в препарате в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика ампициллина на хроматограмме стандартного раствора;
	а1	–	навеска препарата, мг;
	С0	–	концентрация стандартного образца ампициллина тригидрата в стандартном растворе, мг/мл;
	P	–	содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина тригидрата, %;
	G	–	средняя масса содержимого одного флакона, мг;
	L	–	заявленное количество ампициллина в одном флаконе, мг.

Содержание оксациллина C₁₉H₁₉N₃O₅S в препарате в процентах от заявленного количества (Y) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика оксациллина на хроматограмме стандартного раствора;
	а1	–	навеска препарата, мг;
	С0	–	концентрация стандартного образца оксациллина натрия в стандартном растворе, мг/мл;
	P	–	содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;
	G	–	средняя масса содержимого одного флакона, мг;
	L	–	заявленное количество оксациллина в одном флаконе, мг;
	401,4	–	молекулярная масса оксациллина;
	423,4	–	молекулярная масса оксациллина натрия.

Хранение. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».