-
- Главная
- Фармакопея
- ФСО
- Общая информация
Утверждена приказом: | Приказ Минздрава России от 31.10.2018 № 749 |
Дата введения в действие: | c 01.12.2018 |
Издание: | Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания |
Раздел: | 2.5. Лекарственное растительное сырье |
Тип: | Фармакопейная статья (ФС) |
Номер: | ФС.2.5.0046.15 |
Внутр.№: | 2302.1 |
Статус: | Действующая статья |
Собранные в начале созревания и высушенные соплодия многолетнего культивируемого и дикорастущего травянистого растения хмеля обыкновенного - Humulus lupulus L., сем. коноплевых - Cannabaceae.
Внешние признаки. Цельное сырье. Смесь соплодий шаровидных, овально-цилиндрических продолговатых или яйцевидных длиной от 2,5 до 5,0 см и шириной 1,5-2 см. Соплодия состоят из сидячих овальных или яйцевидных прицветных чешуй длиной 1-1,5 см, шириной 0,15-0,9 см, черепитчато-расположенных на коленчатой оси (стерженьке). Жилкование прицветных чешуй дугонервное, переходящее к верхушке в сетчато-нервное. Край прицветных чешуй цельный, верхушка заостренная. У основания прицветные чешуи имеют складку, где размещается плод - округлый приплюснутый орешек коричневого или коричнево-фиолетового цвета длиной 2-3 мм, шириной 2 мм. Плод и основание прицветных чешуй покрыты мелкими блестящими смолистыми, легко отделяемыми лупулиновыми железками оранжево-желтого цвета. При рассмотрении сырья под лупой (10х) или стереомикроскопом (16х) заметно опушение прицветных чешуй с обеих сторон, с нижней стороны жилки выпуклые, покрыты более длинными волосками, стерженьки также опушены. Плод округлый, с гладкой, блестящей поверхностью или покрыт железками, имеет острую верхушку и 2 ребрышка по бокам. Цвет соплодий желтовато-зеленый, золотисто-зеленый, зеленовато-желтый или желтовато-коричневый, прицветные чешуи могут иметь светло-коричневые кончики. Запах характерный. Вкус водного извлечения горький и жгучий.
Измельченное сырье. Смесь частиц соплодий от желтого, желтовато-зеленого, зеленого до желтовато-коричневого цвета, различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10х) или стереомикроскопом (16х) видны кусочки опушенных прицветных чешуй, стерженьков, лупулиновые железки, встречающиеся иногда на прицветных чешуях, чаще - отдельно поодиночке или слипшись по несколько штук, изредка плоды. Запах характерный. Вкус водного извлечения горький и жгучий.
Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов частиц прицветных чешуй с поверхности должны быть видны клетки с извилистыми тонкими стенками и складчатой кутикулой, местами клеточные стенки с неравномерным утолщением (верхний эпидермис), немногочисленные устьица аномоцитного типа (нижний эпидермис). Клетки, расположенные вдоль жилок и по краю прицветных чешуй, несколько вытянуты и имеют утолщенные стенки. Трихомы представлены волосками: головчатыми с 1-2-клеточной ножкой и 1-4-клеточной головкой, часто встречающимися одноклеточными тонкостенными волосками с заостренным концом, реже 3-4-клеточными. По краю прицветных чешуй расположены простые одноклеточные волоски с расширенным основанием.
Железки, часто отделенные от поверхности чешуй, состоят из 1-2- клеточной ножки и головки из большого числа многоугольных тонкостенных клеток. В мезофилле прицветных чешуй находятся друзы оксалата кальция, чаще вблизи жилок, а также клетки губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима). В "давленом" препарате плода встречаются фрагменты околоплодника с извилистыми клетками экзокарпия.
Определение основных групп биологически активных веществ
Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,005 г СО рутина растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в плотно укупоренной упаковке в защищенном от света месте.
Раствор СО гиперозида. Около 0,001 г СО гиперозида растворяют в 2 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в плотно укупоренной упаковке в прохладном, защищенном от света месте.
На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 30 мкл испытуемого раствора (см. раздел "Количественное определение. Сумма флавоноидов" приготовление раствора А испытуемого раствора) и параллельно в одну полосу по 1 мкл раствора СО рутина и раствора СО гиперозида. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 60 мин смесью растворителей этилацетат - уксусная кислота ледяная - вода (5:1:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку выдерживают при 100-105°С в течение 5-10 мин и теплую обрабатывают раствором для детектирования 1, сушат, а затем обрабатывают раствором для детектирования 2, после полного удаления следов растворителей пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме растворов СО рутина и СО гиперозида должна обнаруживаться зона адсорбции желтого или желто-зеленого цвета (рутин) и над ней зона адсорбции желтого или желто-зеленого цвета (гиперозид).
На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться (в порядке возрастания от линии старта) три зоны адсорбции с флуоресценцией желтого или желто-зеленого цвета - одна из них на уровне зоны адсорбции СО рутина, одна из них на уровне зоны адсорбции СО гиперозида и одна выше зоны адсорбции СО гиперозида, над этой зоной адсорбции зона адсорбции зеленого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).
К 1 мл испытуемого раствора (см. раздел "Количественное определение. Сумма флавоноидов" приготовление раствора А испытуемого раствора) прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 2 мин; должно наблюдаться красное окрашивание (лейкоантоцианы).
Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 13%.
Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 14%.
Зола, не растворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 3%.
Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, - не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, - не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, - не более 5%.
Другие части растения (стебли, черешки и листья). Цельное сырье, измельченное сырье - не более 10%.
Осыпавшиеся прицветные чешуи. Цельное сырье - не более 25%. Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.
Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 0,5%.
Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".
Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".
Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".
Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье: сумма флавоноидов в пересчете на рутин - не менее 0,3%; эфирного масла - не менее 0,2%.
Раствор СО рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина (рутина тригидрата), предварительно высушенного при температуре 130-135°С в течение 3 ч, растворяют в 85 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора не более 30 сут при хранении в прохладном, защищенном от света месте.
1,0 мл раствора А СО рутина, 2 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% и 0,1 мл уксусной кислоты, доведенного спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл (раствор Б СО рутина).
Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 25 мл спирта 70%, взвешивают с погрешностью г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры и снова взвешивают, при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом 70% и фильтруют через бумажный складчатый фильтр (раствор А испытуемого раствора).
1,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% и 0,1 мл уксусной кислоты, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора). Оптическую плотность раствор Б испытуемого раствора измеряют через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А испытуемого раствора и 0,1 мл уксусной кислоты, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А СО рутина, 0,1 мл уксусной кислоты и доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) и вычисляют по формуле:
где А - оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;
- оптическая плотность раствора Б СО рутина;
Р - содержание основного вещества в СО рутина, %;
Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:
где А - оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;
- удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм, равный 260;
Определение содержания эфирного масла проводят в соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах" (метод 1 или 2, из 30,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм, время перегонки - 3,5 ч).
1. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин определяют в сырье, предназначенном для получения водных, спиртовых, спирто-водных извлечений, экстрактов.
2. Содержание эфирного масла определяют в сырье, предназначенном для получения эфирного масла.
Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".