Рибавирин Рибавирин Ribavirinum

Рибавирин	ФС.2.1.0031.15
Рибавирин
Ribavirinum

 

1-(-Б-Рибофуранозил)-1H-1,2,4-триазол-3-карбоксамид

 

 

М.м. 244,20

 

Cодержит не менее 98,5% и не более 101,5% рибавирина  в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. Обладает полиморфизмом*.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, мало или очень мало растворим в метиленхлориде.

Подлинность.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400  по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца рибавирина.

2. Тонкослойная хроматография.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). 0,1 М раствор аммония хлорида - ацетонитрил 2:9.

Испытуемый раствор. 10 мг субстанции помещают в пробирку, растворяют в 1 мл воды и перемешивают.

Раствор стандартного образца рибавирина. 10 мг стандартного образца рибавирина помещают в пробирку, растворяют в 1 мл воды и перемешивают.

Раствор анисового альдегида. 5 мл анисового альдегида смешивают с 90 мл спирта 96%, 5 мл серной кислоты концентрированной и 1 мл уксусной кислоты ледяной.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг рибавирина) и раствора стандартного образца рибавирина (100 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают в токе воздуха в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в токе воздуха в течение 15 мин, опрыскивают раствором анисового альдегида, затем сушат при температуре 110°С в течение 30 мин и просматривают при дневном свете.

Зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина.

Удельное вращение. От -33 до -37 в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции, ОФС "Поляриметрия"). Измерение проводят в течение 10 мин после приготовления раствора.

** Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

** Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть бесцветным (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

рН. От 4,0 до 6,5 (2% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Раствор А (0,1% раствор трифторуксусной кислоты). 1 г трифторуксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм и дегазируют.

Раствор В. 450 мл раствора А смешивают с 50 мл метанола и дегазируют.

Испытуемый раствор. Около 20 мг (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл раствора А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор сравнения. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём раствора раствором А до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 5 мг стандартного образца рибавирина и 5 мг гуанозина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 25 мл раствора А и доводят объём раствора раствором А до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Хроматографические условия

 

Колонка	150 мм x 3 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С 18), 3,5 мкм;
Подвижная фаза (ПФ)	ПФ А: 0,1% раствор трифторуксусной кислоты; ПФ Б: смесь раствора А и метанола 90:10;
Температура колонки	30°С;
Скорость потока	0,4 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 210 нм;
Объём пробы	20 мкл.

 

Режим хроматографирования

 

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0-5	90	10
5-15
15-17	0	100
17-19
19-35	90	10

 

Колонку уравновешивают смесью ПФ А и Б 90:10 до достижения стабильной базовой линии.

Хроматографируют последовательно раствор для проверки пригодности хроматографической системы, испытуемый раствор, раствор сравнения, раствор А. Пики раствора А на хроматограмме испытуемого раствора не учитывают.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R) между пиками рибавирина и гуанозина должно быть не менее 10;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков рибавирина и гуанозина должно быть не более 2,0%.

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой единичной примеси должна быть не более 0,5 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (0,25%);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратной площади пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (1,0%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,15 ЕЭ на 1 мг рибавирина (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Испытуемый раствор 1. 10,0 мл испытуемого раствора (см. раздел "Родственные примеси") помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора раствором А до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца рибавирина. Около 20 мг (точная навеска) стандартного образца рибавирина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. 10,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора раствором А до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор используют свежеприготовленным.

Режим элюирования - изократический, подвижная фаза - смесь растворов А и В 90:10.

Содержание рибавирина  в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

 

 

где  - площадь пика рибавирина на хроматограмме испытуемого раствора 1;

 - площадь пика рибавирина на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина;

 - навеска субстанции, г;

 - навеска стандартного образца рибавирина, г;

Р - содержание основного вещества в стандартном образце рибавирина, %.

Хранение. В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

 

______________________________

* Приводится для информации.

** Контроль по показателям качества "Прозрачность раствора", "Цветность раствора" и "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанциях, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

______________________________