Левофлоксацин Левофлоксацин Levofloxacinum

Левофлоксацин	ФС.2.1.0122.18
Левофлоксацин
Levofloxacinum	Вводится впервые

 

(3S)-3-Метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота гемигидрат

 

 

М.м. 370,38

 

Cодержит не менее 98,0% и не более 102,0% левофлоксацина в пересчете на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Светло-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, растворим в уксусной кислоте, мало растворим в спирте 96%.

Подлинность

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400  по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца левофлоксацина.

2. ВЭЖХ. Основной пик на хроматограмме испытуемого раствора должен соответствовать по времени удерживания основному пику на хроматограмме раствора стандартного образца левофлоксацина (см. "Количественное определение").

Удельное вращение. От -92 до -106 в пересчёте на безводное вещество (0,5% раствор субстанции в метаноле, ОФС "Поляриметрия").

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

* Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном  или  (ОФС "Степень окраски жидкостей").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография"). Растворы левофлоксацина используют свежеприготовленными и защищают от света.

Метод 1.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 8,5 г аммония ацетата, 1,25 г меди(II) сульфата и 1,3 г L-изолейцина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - буферный раствор (30:70).

Испытуемый раствор. Около 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в ПФ и доводят объем ПФ до 50,0 мл.

Раствор сравнения А. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца левофлоксацина растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до 50,0 мл.

Раствор сравнения Б. 1,0 мл раствора сравнения А доводят ПФ до 50,0 мл. 1,5 мл полученного раствора доводят ПФ до 100,0 мл.

Раствор сравнения В. Около 20 мг (точная навеска) стандартного образца офлоксацина растворяют в растворе сравнения А и доводят объем раствора тем же растворителем до 20,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 20,0 мл.

Примечание:

Примесь A: (3S)-3-метил-7-оксо-10-(пиперазин-1-ил)-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, CAS 117707-40-1;

примесь B: (3S)-3-метил-10-{[2-(метиламино)этил]амино}-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, CAS 151250-76-9;

примесь C: 4-{(3S)-6-марбокси-3-метил-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-10-ил}-1-метилпиперазин-1-оксид, CAS 117678-38-3;

примесь D: (3S)-3-метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, CAS 117620-85-6;

примесь E: (3R)-3-метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, CAS 100986-86-5.

 

Хроматографические условия

 

Колонка	0,46х25 см октадецилсилил силикагель, 5,0 мкм;
Температура колонки	45°С;
Скорость потока	0,8 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 360 нм;
Объём пробы	25 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания основного пика.

 

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б и В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А относительное стандартное отклонение площади пика левофлоксацина не должно превышать 1,0% (6 определений). На хроматограмме раствора сравнения Б отношение сигнал/шум (S/N) для пика левофлоксацина должно быть не менее 10. На хроматограмме раствора сравнения В разрешение между пиками левофлоксацина и офлоксацина должно быть не менее 2,0.

Относительные времена удерживания соединений. Левофлоксацин - 1; примесь A - 0,47; примесь B - 0,52; примесь C - 0,63; примесь D - 0,73; примесь E - 1,23.

Содержание каждой из примесей в препарате в процентах вычисляют согласно методу нормирования.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A - не более 0,2%;

- примесь B - не более 0,3%;

- примесь C - не более 0,3%;

- примесь D - не более 0,3%;

- примесь E - не более 0,8%;

- любая другая примесь - не более 0,1%;

- суммарное содержание примесей - не более 0,5%, не считая примесь Е.

Метод 2.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 3,08 г аммония ацетата и 8,43 г натрия перхлората, растворяют в воде, доводят рН раствора до  фосфорной кислотой и разбавляют водой до 1000 мл.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил - буферный раствор 16:84 о/о.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил - метанол - буферный раствор 30:20:50.

Испытуемый раствор. Около 40 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 8,0 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до 100,0 мл. При необходимости используют ультразвуковую баню.

Стандартный раствор левофлоксацина 1. Около 40 мг (точная навеска) стандартного образца левофлоксацина растворяют в 8,0 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до 100,0 мл. При необходимости используют ультразвуковую баню.

Стандартный раствор левофлоксацина 2. 1,0 мл стандартного раствора левофлоксацина доводят смесью ацетонитрил-вода (1:10) до 20,0 мл.

Стандартный раствор примеси А. Около 5,0 мг (точная навеска) стандартного образца примеси А левофлоксацина растворяют в 0,2% растворе аммония гидроксида в метаноле и доводят объём этим же растворителем до 100,0 мл.

Стандартный раствор примеси F. Около 10,0 мг (точная навеска) стандартного образца примеси F левофлоксацина ((3S)-3-метил-7-оксо-9,10-дифтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота, CAS 100986-89-8) растворяют в метаноле, используя при необходимости ультразвуковую баню; доводят метанолом до 50,0 мл. 10,0 мл полученного раствора доводят метанолом до 50,0 мл.

Раствор сравнения А. К 1,0 мл стандартного раствора левофлоксацина 2 прибавляют 1,0 мл стандартного раствора примеси F и доводят объём раствора смесью ацетонитрил-вода (1:10) до 50,0 мл.

Раствор сравнения Б. К 5,0 мл стандартного раствора левофлоксацина 1 прибавляют 2,0 мл стандартного раствора примеси А и доводят объём раствора водой до 20,0 мл.

Раствор сравнения В. 1,0 мл раствора сравнения А доводят смесью ацетонитрил-вода (1:10) до 100,0 мл.

Хроматографические условия

 

Колонка	0,4х15 см, октадецилсилил силикагель, 5,0 мкм;
Температура колонки	38°С;
Скорость потока	1,0 мл/мин.;
Детектор	спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы	10 мкл.

 

Градиентное элюирование

 

Время, мин.	ПФА, %	ПФБ, %
0	100	0
5	100	0
10	82	18
15	40	60
30	40	60
30,1	100	0
38	100	0

 

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б и В.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора сравнения Б используется для идентификации пика примеси А, хроматограмма раствора сравнения А используется для идентификации пика примеси F.

Относительные времена удерживания соединений. Левофлоксацин - 1; примесь А - около 0,9; примесь F - около 2,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение (R) между пиками левофлоксацина и примеси А должно быть не менее 2,0. На хроматограмме раствора сравнения А относительное стандартное отклонение площади пика левофлоксацина не должно превышать 5,0% (6 определений).

Чувствительность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения В отношение сигнал/шум должно быть не менее 10.

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

 

 

где  - площадь пика примеси F на хроматограмме испытуемого раствора;

 - площадь пика примеси F на хроматограмме раствора сравнения А;

 - навеска субстанции левофлоксацина, мг;

 - навеска стандартного образца примеси F, мг.

Содержание других примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

 

 

где  - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

 - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения А;

 - навеска субстанции левофлоксацина, мг;

 - навеска стандартного образца левофлоксацина, мг.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А - не более 0,2%;

- примесь F - не более 0,13%;

- любая другая примесь - не более 0,1%;

- суммарное содержание примесей - не более 0,5%.

Вода. От 2,0% до 3,0% (ОФС "Определение воды", метод 1).

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжёлые металлы" в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг левофлоксацина (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. В мерную колбу объемом 1 л вносят 8,5 г аммония ацетата, 1,25 г меди(II) сульфата и 1,3 г L-изолейцина, растворяют в воде и доводят водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - буферный раствор 3:7.

Испытуемый раствор. Около 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в ПФ и доводят объем ПФ до 50,0 мл.

Стандартный раствор. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца левофлоксацина растворяют в ПФ и доводят объем ПФ до 50,0 мл.

Хроматографические условия

 

Колонка	0,46х25 см октадецилсилил силикагель, 5 мкм;
Температура колонки	45°С;
Скорость потока	0,8 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 360 нм;
Объём пробы	10 мкл.

 

Пригодность хроматографической системы. На хроматограммах стандартного раствора

- фактор асимметрии должен быть от 0,5 до 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика левофлоксацина не должно превышать 1,0% (6 определений).

Содержание левофлоксацина  в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

 

 

где  - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора;

 - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме стандартного раствора;

 - навеска субстанции левофлоксацина, мг;

 - навеска стандартного образца левофлоксацина, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание основного вещества в стандартном образце левофлоксацина, %.

Хранение. В защищённом от света месте при температуре не выше 25°С.

 

______________________________

* Контроль по показателям качества "Прозрачность раствора", "Цветность раствора", "Бактериальные эндотоксины", и "Пирогенность" проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

______________________________