-
- Главная
- Фармакопея
- ФСО
- Общая информация
Утверждена приказом: | Приказ Минздрава России от 31.10.2018 № 749 |
Дата введения в действие: | c 01.12.2018 |
Издание: | Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания |
Раздел: | 1.7.2. Методы анализа биологических лекарственных препаратов |
Тип: | Общая фармакопейная статья (ОФС) |
Номер: | ОФС.1.7.2.0038.18 |
Внутр.№: | 2453.1 |
Статус: | Действующая статья |
Определение содержания тритона Х-100 методом обращенно-фазовой ВЭЖХ |
Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания тритона Х-100 в биологических лекарственных препаратах методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Тритон Х-100 (4- (1,1,3,3 - тетраметилбутил) фенил-полиэтиленгликоль) - неионное поверхностно-активное вещество, используется в качестве детергента в процессах инактивации вирусов с липидными оболочками биологических лекарственных препаратов.
Принцип метода обращенно-фазовой ВЭЖХ заключается в распределении компонентов исследуемого образца между полярным элюентом и неполярными группами на поверхности сорбента хроматографической колонки. Основные положения метода обращенно-фазовой ВЭЖХ изложены в ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография".
Для проведения хроматографии используют колонку с сорбентом .
В качестве подвижной фазы применяют смесь ацетонитрил (или метанол): вода с использованием гридиента концентраций или при разделении в изократическом режиме разделения.
Анализ проводят с использованием ультрафиолетового детектора. Выбор длины волны (223 нм или 280 нм) зависит от состава препарата.
Для исключения влияния системных пиков на результаты анализа, хроматографии подвергают растворы подвижной фазы и плацебо.
Условия проведения анализа (тип колонки, состав подвижной фазы, вид элюирования, учёт и интерпретация результатов) должны быть указаны в нормативной документации.
Оценку пригодности хроматографической системы проводят по хроматограммам стандартного раствора.
Если в нормативной документации не указано иное, должны выполняться следующие требования пригодности хроматографической системы:
- величина фактора асимметрии пика тритона Х-100 должна находиться в пределах от 0,8 до 1,5;
- относительное стандартное отклонение площади пика тритона Х-100 не должно превышать 2,0%;
- время удерживания пика тритона Х-100 на хроматограмме стандартного раствора должно соответствовать времени удерживания соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора.
Содержание тритона Х-100 в препарате должно быть не более 3 мг/мл.
Испытуемый раствор. Испытуемый образец разводят по методике, указанной в нормативной документации. Степень разведения испытуемого раствора зависит от исходного содержания тритона Х-100 и условий проведения анализа. В качестве растворителя используют воду очищенную или подвижную фазу.
Стандартный раствор. В качестве стандартного раствора используют соответствующие стандартные образцы тритона Х-100, разведенные до необходимой концентрации тем же растворителем, что и испытуемый раствор.
Контрольный раствор. Используют серию препарата с известным содержанием тритона Х-100. Процедура разведения должна быть аналогична процедуре, предусмотренной для испытуемого раствора, и указана в нормативной документации.