-
- Главная
- Фармакопея
- ФСО
- Общая информация
Утверждена приказом: | Приказ Минздрава России от 31.10.2018 № 749 |
Дата введения в действие: | c 01.12.2018 |
Издание: | Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания |
Раздел: | 1.7.1. Иммунобиологические и биотехнологические лекарственные препараты |
Тип: | Общая фармакопейная статья (ОФС) |
Номер: | ОФС.1.7.1.0017.18 |
Внутр.№: | 2332.1 |
Статус: | Действующая статья |
Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на генно-инженерные препараты инсулина человека, полученные с использованием технологии рекомбинантной ДНК из генетически стабильных и безопасных микроорганизмов.
Требования, изложенные в настоящей общей фармакопейной статье, не распространяются на бычий инсулин, свиной инсулин и инсулин полусинтетический.
Инсулин представляет собой двухцепочечный пептид, имеющий структуру антидиабетического гормона, вырабатываемого поджелудочной железой человека.
Требования на генно-инженерные препараты инсулина человека, могут быть дополнены с учетом специфических свойств лекарственного средства и технологии его производства.
Производство инсулина осуществляется с применением технологии рекомбинантной ДНК и должно проводиться в условиях соблюдения правил надлежащей производственной практики и в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
В качестве клеток-хозяина для создания штамма-продуцента используются бактерии (Escherichia coli) или грибы (Saccharomyces cerevisiae или Pichia pastoris). Производство основано на системе банков клеток-продуцентов - Главного банка клеток (ГБК) и Рабочего банка клеток (РБК).
Схема производственного процесса генно-инженерных препаратов инсулина, как правило, включает:
1. Получение посевного материала штамма-продуцента.
2. Биосинтез рекомбинантного белка (РБ) (препроинсулина):
- ферментация (культивирование продуцента);
- сепарирование (получение биомассы);
- дезинтеграция клеточной суспензии;
- центрифугирование (выделение и отмывка телец включения).
3. Выделение и очистка РБ (препроинсулина).
4. Солюбилизация телец включения и восстановление (денатурация) РБ:
- хроматографическая очистка проинсулина.
5. Ферментативное расщепление проинсулина.
6. Ступени очистки инсулина, каждая из которых включает несколько стадий очистки, например:
- хроматографическая очистка инсулина 1
- хроматографическая очистка инсулина 2
- хроматографическая очистка инсулина 3
7. Получение кристаллического инсулина:
8. Получение лекарственной формы.
Все этапы процесса производства должны быть валидированы, в том числе, эффективность каждого этапа очистки в отношении удаления и/или инактивации посторонних агентов и примесей, источником которых могут быть штамм-продуцент (ДНК), примеси, связанные с процессом производства, например, гетерологичных белков (иммуногенные примеси, компоненты питательных сред, иммуносорбенты для афинной хроматографии и пр.). На всех этапах производства должно контролироваться качество всех полупродуктов и продуктов в соответствии с установленными требованиями или спецификациями.
Экспрессирующая конструкция, штамм-продуцент, производство лекарственного средства, включая банки штаммов-продуцентов, должны быть, охарактеризованы в объёме и в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
При изменениях производственного процесса, представляются доказательства сопоставимости продуктов до и после внесения изменений. Изменения не должны оказывать влияние на качество инсулина и/или стабильность и воспроизводимость процесса производства.
Требования к испытаниям фармацевтических субстанций инсулина регламентируются нижеприведёнными показателями, а также требованиями ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
Описание. Белый или почти белый порошок. Определение проводят визуально.
Подлинность. Подлинность подтверждается методом ВЭЖХ с использованием стандартного образца (пептидным картированием, идентификацией основного вещества), а также определением биоидентичности.
Испытания проводят в соответствии с ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография" и ОФС "Пептидное картирование", ОФС "Биологическое испытание инсулина".
Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Растворимость. Указывают не менее трех растворителей субстанции (например, вода, хлороформ или этанол, разбавленные растворы минеральных кислот и щелочей). Концентрации используемых растворов кислот и щелочей должны быть определенны в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Растворимость".
Прозрачность. Раствор должен быть прозрачным или степень опалесценции не должна превышать эталон I. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
Цветность. Раствор должен быть бесцветным. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Степень окраски жидкостей".
Вода или Потеря в массе при высушивании. Предельно допустимое содержание воды и навеску субстанции, в которой проводят определение, а также методику определения, указывают в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение воды" или ОФС "Потеря в массе при высушивании".
Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси. Содержание родственных соединений и посторонних примесей определяться методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в соответствии с ОФС "Хроматография", ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", а также другими физико-химическими методами.
Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
В зависимости от вида соединения определяют:
- содержание высокомолекулярных белков (примеси): уровень которых не должен превышать 1,0%. Испытания проводят методом эксклюзионной хроматографии;
- содержание родственных соединений (А21-дезамидоинсулин и другие родственные белки, установленной структуры). Уровень А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры нормируется индивидуально. Содержание А21-дезамидоинсулина не должно превышать 2,0%; родственных белков установленной структуры - не должно превышать 1,0%. Содержание А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры также может нормироваться суммарно. При этом их суммарный уровень не должен превышать 2,0%. Испытание проводят методом обращено-фазовой ВЭЖХ;
- посторонние примеси (нормированию подлежит содержание единичная примесь и сумма примесей, при этом содержания А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры не учитываются). Испытание проводят методом обращено-фазовой ВЭЖХ.
Уровень содержания примесей и родственных соединений нормируется в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Сульфатная зола. Не более 10,0%. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведённой в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Цинк. Не более 1,0% в пересчете на сухое вещество. Испытание проводят методом атомной абсорбционной спектрометрии в соответствие с ОФС "Атомная абсорбция" или иным валидированным методом.
Методика определения приводится в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Проинсулин. Не более 10 ppm. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведённой в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Контроль содержания проинсулина предусматривает в случае, если молекулу инсулина получают отщеплением от молекулы проинсулина (внеклеточная экспрессия).
Одноцепочечный предшественник. Контроль содержания одноцепочечного предшественника предусматриваться в случае, если производство инсулина осуществляется методом раздельного конструирования цепей инсулина (Two-chain method).
Остаточные белки штамма-продуцента. Не более 10 ppm. Остаточные белки клетки-хозяина могут быть определены иммунохимическими методами (например, радиоиммунологическим или ИФА). Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Остаточная ДНК штамма-продуцента и плазмидная ДНК. Не более 10 ppm. Определяют методом гибридизации с зондами, меченными биотином, дигоксигенином, другой меткой или другим валидированным методом, например, методом ПЦР или иммуноферментным методом (Treshold system).
Содержание остаточных белков штамм-продуцента и ДНК штамма-продуцента не должно превышать значений, установленных в фармакопейной статье или в нормативной документации, и не превышать показателей, определенных международными требованиями.
Микробиологическая чистота. Субстанция должна выдерживать требования, предъявляемые к фармацевтическим субстанциям, предназначенным для приготовления лекарственных форм для парентерального применения (категория 1.2.Б). Испытания проводят в соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".
Бактериальные эндотоксины. Не более 10 ЕЭ/мг. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
Количественное определение. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Испытания проводят методом ВЭЖХ, в соответствии с ОФС "Хроматография", ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография".
Биологическая активность. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Определяют по гипогликемическому действию субстанции в сравнении с международным стандартным образцом человеческого инсулина (USP RS или международный стандартный образец или ГСО). Испытание проводят соответствие с ОФС "Биологические испытания инсулина".
Транспортирование и хранение. В герметичном контейнере при температуре, указанной в нормативной документации.
Лекарственные генно-инженерные препараты инсулина человека выпускают в лекарственных формах для парентерального применения (раствор для подкожного введения).
Требования к испытаниям лекарственных препаратов инсулина человека регламентируются нижеприведёнными показателями, а также требованиями ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК" и ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ОФС "Растворы".
Описание. Бесцветный прозрачный раствор без посторонних включений. Определение проводят визуально.
Подлинность. Подлинность подтверждается методом ВЭЖХ с использованием стандартного образца (пептидным картированием, идентификацией основного вещества), а также определением биологической активности и/или биоидентичности.
Испытания проводят в соответствии с ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", ОФС "Пептидное картирование" и ОФС "Биологические испытания инсулина".
Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Прозрачность. Должен быть прозрачным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
Цветность. Должен быть бесцветным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС "Степень окраски жидкостей".
рН. Приводится допустимый интервал значений рН. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия".
Извлекаемый объем. Извлекаемый объем должен быть не менее номинального. Определение проводят в соответствии с ОФС "Извлекаемый объем для лекарственных форм для парентерального применения".
Осмолярность. Приводится допустимый интервал значений осмолярности лекарственного препарата. Лекарственный препарат должен выдерживать требования, определенные в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС "Осмолярность".
Примечание: * - при необходимости показатель "Осмолярность" может быть заменен на показатель "Осмоляльность с приведением обоснования".
Механические включения. Видимые и невидимые частицы должны соответствовать требованиям, указанным в ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах" и ОФС "Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения", соответственно. Испытание проводят соответствующими методами, указанными в ОФС.
Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси. В зависимости от вида соединения определяют:
- содержание высокомолекулярных белков (примеси). Испытания проводят методом эксклюзионной хроматографии;
- содержание родственных соединений, к которым относится А21-дезамидоинсулин и другие родственные белки установленной структуры;
Уровень содержания примесей и родственных соединений нормируется в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Испытание проводят в соответствие с методиками определения, приведёнными в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Пролонгированное действие. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведённой в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Контроль пролонгированного действия предусматривается в случае, если лекарственный препарат обладает пролонгированным действием.
Стерильность. Лекарственный препарат должен быть стерильным. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Стерильность" методом прямого посева или мембранной фильтрации.
Бактериальные эндотоксины. Указывают допустимое содержание бактериальных эндотоксинов. Содержание бактериальных эндотоксинов должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
Вещества, вносимые в препарат. Определяют количественное содержание веществ, используемых в качестве консервантов. Содержание консерванта должно соответствовать нормам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Используемый метод, методика определения и нормы определяются типом соединения, входящего в состав лекарственного препарата и приводятся в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат. Выбор метода определения должен быть обоснован.
Количественное определение. Содержание действующего вещества должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят методом ВЭЖХ, в соответствии с ОФС "Хроматография", ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография".
Биологическая активность. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Определяют по гипогликемическому действию лекарственного препарата в сравнении с международным стандартным образцом человеческого инсулина (USP RS или международный стандартный образец или ФСО). Испытание проводят по ОФС "Биологические испытания инсулина".
Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств".
Транспортирование и хранение. В соответствии с ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств". В защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С, не допускается замораживание, если в фармакопейной статье или нормативной документации не указано иное.