-
- Главная
- Фармакопея
- ФСО
- Общая информация
Утверждена приказом: | Приказ Минздрава России от 31.10.2018 № 749 |
Дата введения в действие: | c 01.12.2018 |
Издание: | Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания |
Раздел: | 1.7.1. Иммунобиологические и биотехнологические лекарственные препараты |
Тип: | Общая фармакопейная статья (ОФС) |
Номер: | ОФС.1.7.1.0015.18 |
Внутр.№: | 2330.1 |
Статус: | Действующая статья |
Аминокислотная последовательность
MTPLGPASSL PQSFLLKCLE QVRKIQGDGA ALQEKLCATY
KLCHPEELVL LGHSLGIPWA PLSSCPSQAL QLAGGLSQLH
SGLFLYQGLL QALEGISPEL GPTLDTLQLD VADFATTIWQ
QMEELGMAPA LQPTQGAMPA FASAFQRRAG GVLVASHLQS
Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на филграстимы, действующим веществом которых являются негликозилированные белки, имеющие первичную структуру гранулоцитарно-колониестимулирующего фактора (Г-КСФ с дополнительной аминокислотой (N-концевым метионином), синтезированный рекомбинантным штаммом бактерии Escherichia coli.
Г-КСФ человека продуцируется и секретируется эндотелиальными клетками, моноцитами и другими клетками иммунной системы. Белок стимулирует пролиферацию и дифференцировку лейкоцитарных стволовых клеток в зрелые гранулоциты и их выход в кровь из костного мозга.
Настоящая общая фармакопейная статья включает требования к рекомбинантному филграстиму (гранулоцитарно-колониестимулирующему фактору), полученному с использованием технологии рекомбинантной ДНК с применением в качестве экспрессионной системы бактериальные клетки. Препараты филграстимов стимулируют пролиферацию и дифференцировку нейтрофилов, и их высвобождение из костного мозга в кровь.
Требования, приведенные в настоящей общей фармакопейной статье, могут быть дополнены с учетом специфических свойств лекарственного средства и технологии его производства.
Данная статья не распространяется на модифицированные филграстимы (пегилированные филграстимы).
Производство филграстимов осуществляется с применением технологии рекомбинантной ДНК и должно проводиться в условиях соблюдения правил надлежащей производственной практики.
Экспрессирующая конструкция, штамм-продуцент, производство лекарственного средства, включая банки штаммов-продуцентов, должны быть, охарактеризованы в объёме и в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
В качестве штамма-продуцента филграстима используют рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli, в геном которой методом генной инженерии встроен ген, кодирующий синтез Г-КСФ человека. Производство основано на системе банков клеток-продуцентов - Главного банка клеток (ГБК) и Рабочего банка клеток (РБК).
При изменениях производственного процесса, представляются доказательства сопоставимости продуктов до и после внесения изменений. Изменения не должны оказывать влияние на качество филграстима и/или стабильность и воспроизводимость процесса производства.
Требования к испытаниям фармацевтической субстанции регламентируются нижеприведёнными показателями, а также требованиями ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
Описание. Прозрачная, бесцветная жидкость, допускается слегка желтоватое окрашивание. Определение проводят визуально.
Подлинность. Подлинность должна быть подтверждена с помощью комплекса взаимодополняющих методов (не менее 3), один из которых биологический - определение специфической активности, второй - пептидное картирование. Определение проводят в соответствии с ОФС "Пептидное картирование" - метод, подтверждающий первичную аминокислотную последовательность, позволяющие специфически идентифицировать филграстим с использованием стандартных образцов. Помимо указанных методов, подлинность может быть подтверждена методами: электрофорезом в полиакриламидном геле, изоэлектрическим фокусированием, обращено-фазовой и эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографией и другими методами с доказанной специфичностью. Выбор метода испытания должен быть обоснован.
Для испытаний могут использоваться методы в соответствии с ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", ОФС "Капиллярный электрофорез", ОФС "Электрофорез в полиакриламидном геле", ОФС "Изоэлектрическое фокусирование", ОФС "Определение подлинности и чистоты биологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот", ОФС "Метод иммуноферментного анализа" и другие валидированные методики. Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Прозрачность. Раствор должен быть прозрачным или степень опалесценции не должна превышать эталон 1. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
Цветность. Раствор должен быть бесцветным или не должен превышать окраску эталона Y6. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Степень окраски жидкостей".
рН. Допустимый интервал значений рН указывается в фармакопейной статье и нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия".
Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси.
Чистоту субстанции оценивают комплексом (не менее 3) взаимодополняющих методов, позволяющих охарактеризовать содержание соединений с молекулярной массой большей, чем молекулярная масса филграстима, примесей с зарядом и молекулярной массой, отличающейся от филграстима, родственных белков.
в зависимости от вида примеси определяют:
- содержание соединений с молекулярной массой большей, чем молекулярная масса филграстима не должно превышать 2% (испытания проводят методом эксклюзионной хроматографии в соответствии с ОФС "Хроматография", ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография");
- содержание соединений с зарядом, отличающимся от филграстима не должно превышать 10% (испытание проводят методом изоэлектрического фокусирования в соответствии с ОФС "Изофокусирование");
- содержание соединений с молекулярной массой, отличающейся от филграстима не должно превышать 2% (испытания проводят методом электрофореза в полиакриламидном геле (SDS-PAGE электрофорез) в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях в соответствии с ОФС "Электрофорез", ОФС "Электрофорез в полиакриламидном геле");
- родственные белки: содержание единичной родственной примесей не должно превышать 2%, суммы - 3,5% (испытания проводят методом жидкостной хроматографии в соответствии с ОФС "Хроматография" и ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").
Методики испытаний должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию. Выбор методов оценки чистоты должен быть обоснован.
Остаточные белки клетки-хозяина. Приводят нормы по содержанию остаточных белков клетки-хозяина. Остаточные белки клетки-хозяина могут быть определены иммунохимическими методами (например, радиоиммунологическим или ИФА). Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Содержание остаточных белков клеток-хозяина и ДНК штамма-продуцента не должно превышать значений, установленных в фармакопейной статье или в нормативной документации, и не превышать показателей, определенных международными требованиями.
Остаточная ДНК штамма-продуцента. Нормативные требования не должны превышать значений, указанных в фармакопейной статье или в нормативной документации и недолжны превышать показателей, определенных международными требованиями.
Определение проводят методом гибридизации с зондами, меченными биотином, дигоксигенином, другой меткой или другим валидированным методом. Определение проводят методом гибридизации с зондами, меченными биотином, дигоксигенином, другой меткой или другим валидированным методом. Возможно использования готовых наборов реагентов, с использованием валидированной методики.
Микробиологическая чистота. Субстанция до стерилизующей фильтрации должна выдерживать требования, предъявляемые к фармацевтическим субстанциям, предназначенным для приготовления лекарственных форм для парентерального применения. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".
Стерильность. Субстанция должна быть стерильной, если хранится после стерилизующей фильтрации. Испытания стерильности проводят методом прямого посева или методом мембранной фильтрации в соответствии с ОФС "Стерильность".
Бактериальные эндотоксины. Содержание бактериальных эндотоксинов должно соответствовать нормам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксична. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Аномальная токсичность". Период наблюдения за животными составляет 7 сут.
Белок. Требования должны быть указаны в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой области" или ОФС "Определение белка" или в соответствии с другой валидированной методикой.
Вещества, вносимые в субстанцию. Проводят определение количественного содержания веществ, используемых в качестве стабилизатора (например, полисорбат). Содержание полисорбата должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию. Определение полисорбата проводится в случае, если в состав субстанции входят соединения указанного класса.
Содержание полисорбата определяют методами: обращено-фазовой хроматографии, газовой хроматографии, спектрометрии или иным валидированным методом. Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Полисорбат. Содержание полисорбата должно соответствовать нормам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Определение проводится для субстанций, в состав которых входят соединения указанного класса.
Методика определения, параметры пригодности системы и нормы определяются типом полисорбата, входящего в состав филграстима и используемым методом испытания.
Выбор метода оценки полисорбата должен быть обоснован. Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Специфическая активность.
Субстанция должна выдерживать требования, указанные в фармакопейной статье или нормативной документации. Специфическая активность должна составлять не менее МЕ на 1 мг белка. Количественное определение активности филграстима проводят с использованием биологического метода in vitro на соответствующей линии клеток, чувствительных к филграстиму, оценивая их пролиферацию под влиянием филграстима.
Специфическую активность определяют путем сопоставления активности разведений субстанции и разведений Международного Стандарта филграстима или стандартного препарата, калиброванного по Международному Стандарту в международных единицах.
Методика должны быть изложена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
Транспортирование и хранение. В герметичном контейнере при температуре, указанной в нормативной документации. Для замороженного раствора недопустимо повторное замораживание и оттаивание.
Лекарственные препараты на основе филграстима выпускают в формах для парентерального применения: раствор для инъекций (для внутривенного и подкожного введения) и инфузий.
Требования к испытаниям лекарственных препаратов филграстима регламентируются нижеприведёнными показателями, а также требованиями ОФС "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК" и ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения".
Описание. Приводится описание свойств соответствующей лекарственной формы лекарственного препарата.
Подлинность. Подлинность подтверждается комплексом взаимодополняющих методов, позволяющих специфически идентифицировать филграстим, среди которых обязательными являются биологический и метод пептидного картирования. Испытания подлинность лекарственного препарата проводят в соответствии с ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография", ОФС "Изоэлектрическое фокусирование", ОФС "Капиллярный электрофорез", ОФС "Определение подлинности и чистоты биологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот", ОФС "Метод иммуноферментного анализа" и др.
Прозрачность. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
Цветность. Лекарственный препарат должен соответствовать требования, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Степень окраски жидкостей".
рН. Указывается допустимый интервал значений рН. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия".
Извлекаемый объем. Должен быть не менее номинального должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье и нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС "Извлекаемый объем для лекарственных форм для парентерального применения".
Осмолярность*. Указывается допустимый интервал значений осмолярности лекарственного препарата. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС "Осмолярность".
Примечание: * - при необходимости показатель "Осмолярность" может быть заменен на показатель "Осмоляльность" с приведением обоснования замены.
Механические включения. Видимые механические включения должны соответствовать требованиям ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах".
Невидимые механические включения должны соответствовать требованиям ОФС "Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения".
Испытания проводят в соответствии с указанными ОФС.
Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси.
Испытание проводится аналогично, как указано для фармацевтической субстанции.
Стерильность. Лекарственный препарат должен быть стерильным. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Стерильность" методом прямого посева или мембранной фильтрации.
Бактериальные эндотоксины. Содержание бактериальных эндотоксинов в лекарственном препарате должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
Аномальная токсичность. Лекарственный препарат должен быть нетоксичным. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Аномальная токсичность". Период наблюдения за животными составляет 7 сут.
Белок. Требования должны быть указаны в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой области" и ОФС "Определение белка" или в соответствии с другой валидированной методикой.
Выбор метода определения белка должен быть обоснован.
Вещества, вносимые в препарат.
Полисорбаты. Определение проводится для лекарственных препаратов филграстимов, в состав которых входят соединения указанного класса. Используется метод обращено-фазовой хроматографии, газовой хроматографии, спектрометрический метод или иной метод с доказанной специфичностью, правильностью и прецизионностью.
Методика определения, параметры пригодности системы и нормы определяются типом полисорбата, входящего в состав лекарственного препарата и используемым методом испытания.
Выбор метода оценки полисорбата должен быть обоснован. Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
Испытание проводится аналогично, как указано для фармацевтической субстанции.
Специфическая активность. Специфическая активность должна соответствовать нормам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Количественное определение активности филграстима проводят с использованием биологического метода in vitro на соответствующей линии клеток, чувствительных к филграстиму, оценивая их пролиферацию под влиянием филграстима.
Специфическую активность лекарственного препарата определяют путем сопоставления активности разведений испытуемого препарата и разведений Международного Стандарта филграстима или стандартного препарата, калиброванного по Международному Стандарту в международных единицах.
Испытание проводят в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье или нормативной документации.
Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Методы определения специфической активности с использованием стандартных образцов приводятся в фармакопейной статье или нормативной документации.
Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств".
Транспортирование, хранение. В соответствии с ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств". В защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С, не допускается замораживание.