ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

9-[[(2E)-4-[(2S,3R,4R,5S)-3,4-Дигидрокси-5-[[(2S,3S)-3-[(1S,2S)-2-гидрокси-1-метилпропил]оксиранил]метил]тетрагидро-2H-пиран-2-ил]-3-метилбут-2-еноил]окси]нонановая кислота.

Субстанцию получают при росте определённых штаммов Pseudomonas fluorescens или любым другим способом.

Содержание: от 93,0 % до 102,0 % в пересчёте на безводную и свободную от остаточных органических растворителей субстанцию.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, легко растворим в ацетоне, в этаноле и метиленхлориде.

Проявляет полиморфизм.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Образец сравнения: фармакопейный стандартный образец мупироцина.

Требование: инфракрасный спектр поглощения испытуемого образца должен соответствовать инфракрасному спектру фармакопейного стандартного образца мупироцина.

ИСПЫТАНИЯ

pH (ОФС «Ионометрия», метод 3). От 3,5 до 4,0. Для определения используют свежеприготовленный раствор. 10 г испытуемого образца растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Удельное оптическое вращение (ОФС «Оптическое вращение»).
От –21 до –17 в пересчёте на безводную субстанцию.

0,50 г растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

Родственные примеси. Метод ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Смесь растворителей. Смешивают 50 объёмов метанола и 50 объёмов раствора 13,6 г/л натрия ацетата, pH которого предварительно доводят уксусной кислотой разведённой 30 % до 4,0.

Испытуемый раствор. 50,0 мг испытуемого образца растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора смесью растворителей до 10,0 мл.

Раствор сравнения (а). 1,0 мл испытуемого раствора доводят смесью растворителей до объёма 50,0 мл.

Раствор сравнения (б). 10 мл раствора сравнения (а) доводят до pH 2,0, используя хлористоводородную кислоту концентрированную, и выдерживают 20 ч.

Примечание

Примесь C (псевдомоновая кислота D): (4E)-9-[[(2E)-4-[(2S,3R,4R,5S)-3,4-дигидрокси-5-[[(2S,3S)-3-[(1S,2S)-2-гидрокси-1-метилпропил]оксиранил]метил]тетрагидро-2H-пиран-2-ил]-3-метилбут-2-еноил]окси]нон-4-еновая кислота.

Условия хроматографирования:

- колонка: длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм; заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии с размером частиц 5 мкм;

- подвижная фаза: смешивают 20 объёмов воды для хроматографии, 30 объёмов тетрагидрофурана и 50 объёмов раствора 10,5 г/л аммония ацетата, рН которого предварительно доводят уксусной кислотой разведённой 30 % до 5,7;

- скорость потока подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

- детектор: спектрофотометрический; длина волны, 240 нм;

- вводимый объём пробы: 20 мкл;

- время хроматографирования: должно в 3,5 раза превышать время удерживания мупироцина.

Относительное время удерживания по отношению к мупироцину: примесь C – около 0,75.

Пригодность хроматографической системы (раствор сравнения (б)):

- разрешение (R_S): не менее 7,0 между вторым из двух пиков, образованных продуктами гидролиза, и пиком мупироцина.

Пределы содержания примесей:

- примесь C: не более чем в 2 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а) (4 %);

- любые примеси: для каждой примеси не более чем 0,5 от площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а) (1 %);

- сумма примесей: не более чем в 3 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а) (6 %);

- неучитываемый предел: 0,05 от площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а) (0,1 %).

Остаточные органические растворители (ОФС «Остаточные органические растворители»).

Вода (ОФС «Определение воды», метод 1, методика А).
Не более 1,0 %. Определение проводят с использованием 0,5 г испытуемого образца.

Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требования испытания на микробиологическую чистоту.

Испытание проводят для нестерильных субстанций.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Метод ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор. 25,0 мг испытуемого образца растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора до 200 мл аммония ацетатом раствором 0,75 %, рН которого предварительно доводят уксусной кислотой разведённой 30 % до 5,7.

Раствор сравнения (а). 25,0 мг фармакопейного стандартного образца мупироцина лития растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора до 200 мл аммония ацетатом раствором 0,75 %, рН которого предварительно доводят уксусной кислотой разведённой 30 % до 5,7.

Раствор сравнения (б). 10 мл испытуемого раствора доводят до pH 2,0, используя хлористоводородную кислоту концентрированную и выдерживают 20 ч.

Условия хроматографирования:

- колонка: длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм; заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии с размером частиц 5 мкм;

- подвижная фаза: смешивают 19 объёмов воды для хроматографии, 32 объёма тетрагидрофурана и 49 объёмов раствора 10,5 г/л аммония ацетата, рН которого предварительно доводят уксусной кислотой разведённой 30 % до 5,7;

- скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

- детектор: спектрофотометрический; длина волны, 230 нм;

- вводимый объём пробы: 20 мкл.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение (R_S): не менее 7,0 между вторым из двух пиков, образованных продуктами гидролиза, и пиком, обусловленным раствором сравнения (б);

- повторяемость: относительное стандартное отклонение не более 1,0 % для 6 повторных введений раствора сравнения (а).

Содержание C₂₆H₄₄O₉ в процентах рассчитывают, используя хроматограмму раствора сравнения (а), с учётом значения содержания мупироцина лития в фармакопейном стандартном образце мупироцина лития и коэффициента пересчёта 0,988.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.