Хлоргексидина диацетат

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

N¹,N^1'-(Гексан-1,6-диил)бис[N³-(4-хлорфенил)имидодикарбонимид диамид] диацетат.

Содержание: от 98,0 % до 101,0 % в пересчёте на сухую субстанцию.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый микрокристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, растворим в этаноле 96 %, мало растворим в глицероле и пропиленгликоле.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Первая идентификация: A.

Вторая идентификация: Б, В и Г.

А. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Образец сравнения: фармакопейный стандартный образец хлоргексидина диацетата.

Требование: инфракрасный спектр испытуемого образца должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлоргексидина диацетата.

Б. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. 5 мг испытуемого образца растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 10 мл.

Раствор сравнения. 5 мг фармакопейного стандартного образца хлоргексидина диацетата растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 10 мл.

Условия хроматографирования:

- ТСХ пластинка со слоем силикагеля F₂₅₄;

- подвижная фаза: муравьиная кислота безводная – вода – этанол 96 % – метиленхлорид  (7:10:40:50 об/об/об/об);

- наносимый объём пробы: 5 мкл, объём может быть изменён в зависимости от типа используемой пластинки;

- высушивание: на воздухе;

- детектирование А: просматривание в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм;

Требование А: на хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, соответствующая ей по положению и величине;

- детектирование Б: опрыскивание меди(II) cульфата раствором 12,5 % и просматривание при  дневном свете;

Требование Б: на хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции на уровне основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, соответствующая ей по положению, окраске и величине.  

В. Качественная реакция.

Испытуемый образец нагревают с равным количеством щавелевой кислоты дигидрата. Должны выделиться пары с характерным запахом уксусной кислоты.

Г. Качественная реакция. 5 мг испытуемого образца растворяют в 5 мл тёплого раствора 10 г/л цетримида, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора концентрированного и 1 мл бромной воды. Должно появиться тёмно-красное окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Примесь P (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Не более 500 ppm.

Испытуемый раствор . 0,20 г испытуемого образца растворяют в 25 мл

воды, встряхивая при необходимости. К полученному раствору прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 30 мл. Быстро прибавляют, тщательно перемешивая после каждого прибавления: 5 мл 103 г/л кислоты хлористоводородной, 0,35 мл натрия нитрита раствора 10 %, 2 мл аммония сульфамата раствора 5 %, 5 мл нафтилэтилендиамина дигидрохлорида раствора 0,1 % и 1 мл этанола 96 %, количественно переносят в мерную колбу, доводят объём раствора водой до 50 мл и выдерживают в течение 30 мин.

Растворы сравнения. Готовят растворы, содержащие соответственно 50 ppm, 100 ppm, 200 ppm, 500 ppm и 600 ppm примеси P в испытуемом образце, следующим образом: 1,0 мл, 2,0 мл, 4,0 мл, 10,0 мл и 12,0 мл раствора 0,010 г/л хлоранилина (Примесь P: 4-хлоранилин) в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % доводят водой до объёма 20 мл. Затем прибавляют 10 мл воды. Быстро прибавляют, тщательно перемешивая после каждого прибавления: 5 мл 103 г/л кислоты хлористоводородной, 0,35 мл натрия нитрита раствора 10 %, 2 мл аммония сульфамата раствора 5 %, 5 мл нафтилэтилендиамина дигидрохлорида раствора 0,1 % и 1 мл этанола 96 %, доводят объём раствора водой до 50 мл и выдерживают в течение 30 мин.

Измеряют оптическую плотность каждого раствора сравнения при длине волны 556 нм и строят градуировочный график.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора при длине волны 556 нм. Определяют концентрацию хлоранилина по градуировочному графику.

Родственные примеси. Метод ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы хранят при температуре не выше 12 °C.

Испытуемый раствор. 0,140 г испытуемого образца растворяют в подвижной фазе А и доводят этим же растворителем до объёма 100,0 мл.

Раствор сравнения (а). 5 мг фармакопейного стандартного образца хлоргексидина для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A,B,H,I,K,N и O) растворяют в 1,0 мл подвижной фазы A.

Раствор сравнения (б). 1,0 мл испытуемого раствора доводят подвижной фазой A до объема 100,0 мл.

Примечание

Примесь A: N¹-(4-хлорфенил)-N³-[6-[(N-цианокарбамимидоил)амино]гексил]имидодикарбонимид диамид.

Примесь B: N-[N-[6-[[N-[N-(4-хлорфенил)карбамимидоил]-карбамимидоил]амино]гексил]карбамимидоил]мочевина.

Примесь H: N¹,N¹′-[азандиилбис(карбонимидоилазандиилгексан-6,1-диил)]бис[N³-(4-хлорфенил)имидодикарбонимид диамид].

Примесь I: неизвестная структура.

Примесь K: N-(4-хлорфенил)-N′-[N-[6-[[N-[N-(4-хлорфенил)карбамимидоил]карбамимидоил]амино]гексил]-карбамимидоил]мочевина.

Примесь N: N¹-[6-(карбамимидоиламино)гексил]-N³-(4-хлорфенил)имидодикарбонимид диамид.

Примесь O: N¹-[6-[[N-[N-(2-хлорфенил)карбамимидоил]карбамимидоил]амино]гексил]-N³-(4-хлорфенил)имидодикарбонимид диамид.

Условия хроматографирования:

- колонка: длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм; заполненная  силикагелем октадецилсилильным, эндкепированным, для хроматографии  с размером частиц 5 мкм;

- температура колонки: 30 °C;

- подвижная фаза  А: смешивают 20 объёмов 0,1 %  раствора кислоты трифторуксусной в ацетонитриле и 80 объёмов трифторуксусной кислоты раствора 0,1 % в воде для хроматографии;

- подвижная фаза Б: смешивают 10 объёмов трифторуксусной кислоты раствора 0,1 % в воде для хроматографии и 90 объёмов 0,1 %  раствора кислоты трифторуксусной в ацетонитриле;

- режим градиентного элюирования:

- скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

- детектор: спектрофотометрический, длина волны 254 нм;

- вводимый объём пробы: по 10 мкл.

Идентификация примесей: для идентификации пиков примесей A,B,H,I,K,N и O используют хроматограмму прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу хлоргексидина для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму раствора сравнения (а).

Относительное время удерживания (время удерживания хлоргексидина около 35 мин): примесь N – около 0,35; примесь B – около 0,36; примесь A – около 0,6; примесь H – около 0,85; примесь O – около 0,90; примесь I – около 0,91; примесь K – около 1,4.

Пригодность хроматографической системы (раствор сравнения (a)):

- отношение максимум/минимум (p/v): не менее 2, где H_p – высота пика примеси B относительно базовой линии и H_v – высота над базовой линией наиболее низкой точки кривой, разделяющей данный пик от пика примеси N;

Пределы содержания примесей:

- сумма примесей I и O: не более чем 0,4- кратная площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,4 %);

- примесь K: не более чем 0,3-кратная площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,3 %);

- примеси A,H,N: для каждой примеси не более чем 0,15-кратная площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,15 %);

- неидентифицированные примеси: для каждой примеси не более чем 0,1-кратная площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,10 %);

- сумма примесей: не более чем 0,8- кратная площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,8 %);

- неучитываемый предел: не учитывают пики с площадью менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,05 %);

Потеря в массе при высушивании (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Не более 3,5 %. 1,000 г испытуемого образца высушивают в сушильном шкафу при температуре 105 °C.

Сульфатная зола (ОФС «Сульфатная зола»). Не более 0,15 %.

Определение проводят с использованием 1,0 г испытуемого образца.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Титриметрия. ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

0,140 г испытуемого образца растворяют в 100 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,64 мг С₂₆H₃₈CI₂N₁₀O₄.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке,  в защищённом от света месте.