Фузидовая кислота

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

энт-(17Z)-16α-(Ацетилокси)-3β,11β-дигидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота гемигидрат.

Субстанция, получаемая путём ферментации определённых штаммов Fusidium coccineum, или полученная любым другим способом.

Содержание: от 97,5 % до 101,0 % в пересчёте на безводную и свободную от остаточных органических растворителей субстанцию.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и легко растворим в спирте 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

А. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Образец сравнения: фармакопейный стандартный образец фузидовой кислоты.

Требование: инфракрасный спектр поглощения испытуемого образца должен соответствовать инфракрасному спектру фармакопейного стандартного образца фузидовой кислоты.

Б. Качественная реакция

Сжигают 1 г испытуемого образца, полученный остаток не должен давать реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Метод ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Смесь растворителей: метанол – раствор 5 г/л фосфорной кислоты концентрированной – ацетонитрил (10:40:50 об/об/об).

Испытуемый раствор. 25 мг испытуемого образца растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 10,0 мл.

Раствор сравнения (а). 2 мг фармакопейного стандартного образца фузидовой кислоты для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, D, F, G, H и N растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 1,0 мл.

Раствор сравнения (б). 1,0 мл испытуемого раствора доводят смесью растворителей до объёма 100,0 мл.

Раствор сравнения (в). 1,0 мл раствора сравнения (б) доводят смесью растворителей до объёма 10,0 мл.

Раствор сравнения (г). Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом фузидовой кислоты, содержащего смесь примесей I, K, L и M растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 1,0 мл.

Примечание

Примесь А (24,25-дигидро-24,25-дигидроксифузидовая кислота): энт-(24SR,17Z)-16α-(ацетилокси)-3β,11β,24,25-тетрагидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холест-17(20)-ен-21-овая кислота.

Примесь В (24,25-дигидро-24,25-дигидроксифузидовой кислоты 21,25-лактон): [энт-(17Z)-3β,11β-дигидрокси-17-[(6SR)-6-гидрокси-7,7-диметил-2-оксооксепан-3-илиден]-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-андростан-16α-ил]ацетат.

Примесь С ((24R)-24,25-дигидро-24,25-дигидроксифузидовой кислоты 21,24-лактон): [энт-(17Z)-3β,11β-дигидрокси-17-[(6S)-6-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-оксодигидро-2H-пиран-3(4H)-илиден]-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-андростан-16α-ил]ацетат.

Примесь D ((24S)-24,25-дигидро-24,25-дигидроксифузидовой кислоты 21,24-лактон): [энт-(17Z)-3β,11β-дигидрокси-17-[(6R)-6-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-оксодигидро-2H-пиран-3(4H)-илиден]-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-андростан-16α-ил]ацетат.

Примесь F (26-оксофузидовая кислота): энт-(17Z,24EZ)-16α-(ацетилокси)-3β,11β-дигидрокси-4β,8,14-триметил-26-оксо-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота.

Примесь G (3-дидегидрофузидовая кислота): энт-(17Z)-16α-(ацетилокси)-11β-гидрокси-4β,8,14-триметил-3-оксо-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота.

Примесь H (11-дидегидрофузидовая кислота): энт-(17Z)-16α-(ацетилокси)-3β-гидрокси-4β,8,14-триметил-11-оксо-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота.

Примесь I (16-эпи-деацетилфузидовая кислота): энт-(17Z)-3β,11β,16β-тригидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота.

Примесь K (деацетилфузидовой кислоты 21,16-лактон): энт-(17Z)-3β,11β-дигидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диено-21(16α)-лактон.

Примесь L (9,11-ангидрофузидовая кислота): энт-(17Z)-16α-(ацетилокси)-3β-гидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холеста-9(11),17(20),24-триен-21-овая кислота.

Примесь М (11-дезоксифузидовая кислота): энт-(17Z)-16α-(ацетилокси)-3β-гидрокси-4β,8,14-триметил-18-нор-5β,10α-холеста-17(20),24-диен-21-овая кислота.

Примесь N: неизвестная структура.

Условия хроматографирования:

- колонка: длиной 0,15 м и внутренним диаметром 4,6 мм; заполненная силикагелем октадецилсилильным эндкепированным для хроматографии с размером частиц 3,5 мкм;

- температура колонки: 30 °С;

- подвижные фазы:

- подвижная фаза А: метанол – ацетонитрил – раствор 5 г/л фосфорной кислоты концентрированной (20:40:40 об/об/об);

- подвижная фаза Б: раствор 5 г/л фосфорной кислоты концентрированной – метанол – ацетонитрил (10:20:70 об/об/об);

- режим градиентного элюирования:

- скорость потока подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

- детектор: спектрофотометрический; длина волны, 235 нм;

- вводимый объём пробы: по 20 мкл.

Идентификация примесей: для идентификации пиков примесей A, B, C, D, F, G, H и N используют хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу фузидовой кислоты для идентификации пиков и хроматограмму раствора сравнения (а); для идентификации примесей I, K, L и M используют хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу фузидовой кислоты, содержащего смесь примесей и хроматограмму раствора сравнения (г).

Относительное время удерживания (время удерживания фузидовой кислоты – около 18 мин): примесь A – около 0,4; примесь B – около 0,5; примесь C – около 0,6; примесь D – около 0,63; примесь N – около 0,65; примесь F – около 0,7; примесь G – около 0,82; примесь H – около 0,85; примесь I – около 0,96; примесь K – около 1,18; примесь L – около 1,23; примесь M – около 1,4.

Пригодность хроматографической системы (раствор сравнения (а)):

- разрешение (R_S): не менее 1,5 между пиками примесей G и H.

Пределы содержания примесей:

- поправочные коэффициенты: умножают площади пиков примесей на соответствующие поправочные коэффициент: примесь C – 0,7;
примесь D – 0,7; примесь F – 0,3; примесь I – 0,6; примесь K – 0,6;

- примесь M: не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (1,0 %);

- примесь G: не более чем в 0,7 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,7 %);

- примесь L: не более чем в 0,5 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (0,5 %);

- примесь B: не более чем в 4 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (в) (0,4 %);

- примесь A: не более чем в 3 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (в) (0,3 %);

- примеси C, D, F, I, K, N: для каждой примеси не более чем в 2 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (в) (0,2 %);

- неидентифицированные примеси: для каждой примеси не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (в) (0,1 %);

- сумма примесей: не более чем в 2 раза больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (2,0 %);

- неучитываемый предел: 0,5 от площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (в) (0,05 %).

Остаточные органические растворители (ОФС «Остаточные органические растворители»).

Вода (ОФС «Определение воды», метод 1). От 1,4 % до 2,0 %.

Определение проводят с использованием 0,5 г испытуемого образца.

Сульфатная зола (ОФС «Сульфатная зола»). Не более 0,2 %.

Определение проводят с использованием 1,0 г испытуемого образца.

Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требования испытания на микробиологическую чистоту.

Испытание проводят для нестерильных субстанций.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Титриметрия. ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

0,400 г испытуемого образца растворяют в 10 мл этанола 96 %, прибавляют 0,5 мл фенолфталеина раствора 0,1 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розовой окраски.

1 мл 0,1 М раствор натрия гидроксида соответствует 51,67 мг C₃₁H₄₈O₆.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте, при температуре от 2 °С до 8 °С.