Метилдопы сесквигидрат

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-Амино-3-(3,4-дигидроксифенил)-2-метилпропановая кислота сесквигидрат

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % метилдопы C₁₀H₁₃NO₄ в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, мало растворим в воде, очень мало растворим или практически не растворим в спирте 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метилдопы.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания L-метилдопы на хроматограмме раствора стандартного образца метилдопы (раздел «Родственные примеси. 1. Энантиомерная чистота»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельный показатель поглощения. От 122 до 137 (в максимуме поглощения) при длине волны 280 нм в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 280 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Цветность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 25 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, должен выдерживать сравнение с эталоном B₆  или BY₆ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Нагревают 1 г субстанции на водяной бане с 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 %. Раствор должен окрашиваться в жёлтый цвет при прибавлении не более 0,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

1.     Энантиомерная чистота

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют раздельно 0,2 г меди ацетата и 0,387 г N,N-диметил-L-фенилаланина в воде. Смешивают оба раствора и сразу доводят pH раствора уксусной кислотой до 4,3. Полученный раствор помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 50 мл метанола, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца метилдопы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца рацемической смеси метилдопы, растворяют в ПФ, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Уравновешивают колонку ПФ в течение не менее 2 часов.

Хроматографируют раствор стандартного образца метилдопы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. L-метилдопа –1 (около 14 мин); D-метилдопа – около 0,7; отрицательного системного пика – около 0,45.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца метилдопы:

- разрешение (R_S) между пиками L-метилдопы и D-метилдопы должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика D-метилдопы не должна превышать площадь пика метилдопы на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

2.     Родственные примеси

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—0,1 М фосфатный буферный раствор pH 3,0 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

Готовят раствор фармакопейного стандартного образца метилдопы для проверки пригодности хроматографической системы в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, с концентрацией 0,02 мг/мл.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл раствора сравнения, доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: (2S)-2-Амино-3-(4-гидрокси-3-метоксифенил)-2-метилпропановая кислота, CAS 6739-31-7;

Примесь В: (2S)-2-Амино-3-(4-метоксифенил)-2-метилпропановая кислота, CAS 65555-88-6;

Примесь С: (2S)-2-Амино-3-(3,4-диметоксифенил)-2-метилпропановая кислота, CAS 39948-18-0.

Хроматографические условия

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метилдопа –1 (около 5 мин); примесь А – около 1,9; примесь B – около 4,3; примесь C – около 4,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B и C используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками примеси B и примеси C должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей, площадь пика каждой примеси умножается на соответствующий ей поправочный коэффициент: примесь B –2,6; примесь C –1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика метилдопы на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь любой (другой) примеси не должна превышать половину площади пика метилдопы на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика метилдопы на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади пика метилдопы на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Хлориды. Не более 0,1 % (ОФС «Хлориды). Для определения используют 20 мг субстанции, растворённой в 10 мл воды и 0,5 мл азотной кислоты.

Вода. От 10,0 % до 13,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3 Б, в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В 50 мл уксусной кислоты безводной растворяют 0,18 г (точная навеска) субстанции и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,12 мг метилдопы C₁₀H₁₃NO₄.

ХРАНЕНИЕ

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.