Гидроксиэтилкрахмал

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

 

 

 

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

 

Гидроксиэтилкрахмал		ФС.2.1.0257
Гидроксиэтилкрахмал
Amylum hydroxyaethylicum		Вводится впервые

 

 

[56-40-6]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Частично 2-O-гидроксиэтилированный кукурузный или картофельный крахмал. Получают частичным кислым гидролизом крахмала и дальнейшей реакцией с этиленоксидом.

Тип гидроксиэтилкрахмала определяется двумя характеристиками: среднемассовой молекулярной массой и молярным замещением – количеством гидроксиэтильных групп на звено ангидроглюкозы. Значения данных характеристик зависят от пути синтеза субстанции.

Гидроксиэтилкрахмал также характеризуется отношением числа гидроксиэтильных групп в положении 2 глюкозы (С₂) к числу гидроксиэтильных групп в положении 6 (С₆): С₂/С₆.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде и диметилсульфоксиде, практически нерастворим в этаноле.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см⁻¹ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы. Допустимы различия в интенсивности некоторых полос.

2. Качественная реакция. К 5 мл 5 % раствора субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл йода раствора 0,05 М; должно появиться красно-коричневое или сине-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 5,0 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора субстанции, полученного в испытании «Прозрачность раствора» и профильтрованного через фильтр с размером пор 0,2 мкм, измеренная при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,025 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,5 до 7,0 (к 25 мл 5 % раствора субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл насыщенного раствора калия хлорида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Среднемассовая молекулярная масса и молекулярно-массовое распределение. Определение проводят методом эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»).

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 54,34 г натрия ацетата, 0,5 г натрия азида, растворяют в воде, прибавляют 100 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100 мл буферного раствора и доводят объём водой до метки. Дважды фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г высушенной субстанции, растворяют в 50 мл воды, прибавляют 10 мл буферного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (А). Для приготовления раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (А):

- при заявленной молекулярной массе испытуемой субстанции ниже 300 000 (см. Нормативные требования) используют фармакопейный стандартный образец гидроксиэтилкрахмала со средней молекулярной массой около 130 000;

- при заявленной молекулярной массе испытуемой субстанции выше 300 000 (см. Нормативные требования) используют фармакопейный стандартный образец гидроксиэтилкрахмала со средней молекулярной массой около 500 000.

В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,4 г фармакопейного стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней или высокой молекулярной массы, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 2 мл буферного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Б). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (В). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Г). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (В) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	300 мм × 7,5 мм, полиметакрилатный гидроксилированный гель для хроматографии; 4 последовательно соединённые колонки:   Размер частиц, мкм Размер пор, нм 1 17 > 100 2 17 100 3 10 20 4 10 12,5
Температура колонки	22 °С;
Скорость потока	0,5–1,0 мл/мин;
Детектор	последовательно соединённые детекторы многоуглового рассеивания лазерного света и рефрактометрический, 35 °С;
Объём пробы	50 мкл.

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (А) и (Б).

Определяют подходящий раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала:

- если среднемассовая молекулярная масса, определённая с помощью раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Б) отличается от средней молекулярной массы, определённой с помощью раствора стандартного образца (А), не более чем на 3 %, для проверки пригодности хроматографической системы используют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (А);

- если отклонение более 3 %, хроматографируют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (В) и повторно определяют среднюю молекулярную массу; если средняя молекулярная масса, определённая с помощью раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (В) не отличается более чем на 3 % от средней молекулярной массы, определённой с помощью раствора стандартного образца (Б), для проверки пригодности хроматографической системы используют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Б);

- если отклонение снова более 3 %, хроматографируют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Г) и определяют среднюю молекулярную массу; если средняя молекулярная масса, определённая с помощью раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (Г) не отличается более чем на 3 % от средней молекулярной массы, определённой с помощью раствора стандартного образца (В), для проверки пригодности хроматографической системы используют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала (В).

Пригодность хроматографической системы. Среднемассовая молекулярная масса, определённая для стандартного образца гидроксиэтилкрахмала, не должна отличаться от заявленной для него среднемассовой молекулярной массы более чем на 5 %.

При необходимости разводят испытуемый раствор до концентрации раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала, использованного для определения средней молекулярной массы.

Используют подходящее интегрирующее устройство для определения среднемассовой молекулярной массы и молекулярных масс на границах 10 % низко и высокомолекулярных фракций.

Нормативные требования:

Для ГЭК с низкой молекулярной массой (2 000–100 000 Да)	Для ГЭК со средней молекулярной массой (100 000–300 000 Да)	Для ГЭК с высокой молекулярной массой (300 000–900 000 Да)
Среднемассовая молекулярная масса должна составлять не менее 85 % и не более 115 % от заявленной молекулярной массы
Среднемассовая молекулярная масса на границе с 10 % низкомолекулярной фракции должна быть более 10 % от заявленной молекулярной массы	Среднемассовая молекулярная масса на границе с 10 % низкомолекулярной фракции должна быть более 15 000 Да
Среднемассовая молекулярная масса на границе с 10 % высокомолекулярной фракции должна быть менее 300 % от заявленной молекулярной массы		Среднемассовая молекулярная масса на границе с 10 % высокомолекулярной фракции должна быть менее 500 % от заявленной молекулярной массы

Соотношение С2/С6. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор серной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мл воды, прибавляют 5,5 мл серной кислоты концентрированной, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор А. Раствор серной кислоты—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В два флакона вместимостью 5 мл помещают по 0,18 г субстанции, прибавляют по 3,0 мл раствора А, укупоривают флакон и встряхивают до растворения. Выдерживают флакон в течение 4 ч при температуре 100 °С, периодически встряхивая. Охлаждают до комнатной температуры. К полученному раствору осторожно прибавляют 0,9 г бария карбоната, встряхивают и затем центрифугируют при 10 000 об/мин в течение 15 мин. Проверяют раствор на нейтральность рН с помощью индикаторной бумаги. Если раствор сохраняет кислую среду, прибавляют бария карбонат порциями по 0,2 г до достижения нейтральной реакции среды. Раствор фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм. Во флакон помещают 0,5 мл фильтрата и выпаривают досуха при температуре 40 °С (обычно требуется несколько часов). Остаток растворяют в смеси 0,50 мл пиридина, 0,25 мл N, О-бис(триметилсилил)ацетамида и 25 мкл хлортриметилсилана. Флакон укупоривают и выдерживают в течение 1 ч при температуре 40 °С, периодически встряхивая. Охлаждают до комнатной температуры.

Раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы. Готовят раствор, содержащий 0,18 г фармакопейного стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы, как описано для испытуемого раствора.

Хроматографические условия

Колонка	кварцевая капиллярная 15 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 0,25 мкм;
Детектор	пламенно-ионизационный;
Газ-носитель	водород для хроматографии;
Деление потока	1:20;
Давление газа-носителя	69 кПа;
Режим хроматографирования	постоянное давление;
Объём пробы	1 мкл.

Температурная программа

	Время, мин	Температура, °С
Колонка	0–1	150
	1–25	150 → 270
	25–28	270
Инжектор		250
Детектор		300

Хроматографируют раствор стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы и испытуемый раствор.

Идентификация пиков. Для идентификации пиков используется хроматограмма, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу гидроксиэтилкрахмала, и хроматограмма раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидроксиэтилкрахмала средней молекулярной массы:

- разрешение (R_S) между пиками 2-O-гидроксиэтил-ß-D-глюкозы и 6-O-гидроксиэтил-ß-D-глюкозы должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) дериватизированного продукта 1 должен быть не менее 0,6 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика дериватизированного продукта 1 должно быть не более 5,0 (для трёх инжекций).

Соотношение С₂ /С₆ вычисляют по формуле:

где	S1	-	площадь пика дериватизированного продукта 1 на хроматограмме испытуемого раствора;
	S2	-	площадь пика дериватизированного продукта 2 на хроматограмме испытуемого раствора;
	S3	-	площадь пика дериватизированного продукта 3 на хроматограмме испытуемого раствора
	S4	-	площадь пика 2-O-гидроксиэтил-α-D-глюкозы на хроматограмме испытуемого раствора;
	S5	-	площадь пика 2-O-гидроксиэтил-ß-D-глюкозы на хроматограмме испытуемого раствора;
	S6	-	площадь пика 6-O-гидроксиэтил-α-D-глюкозы на хроматограмме испытуемого раствора;
	S7	-	площадь пика 6-O-гидроксиэтил-ß-D-глюкозы на хроматограмме испытуемого раствора.

Рассчитывают среднее значение соотношения С₂/С₆ по величинам, полученным по 2 испытуемым растворам.

Результаты анализа считаются достоверными, если различие значений между двумя испытуемыми растворами не превышает 5 %.

Допустимое содержание – от 80 % до 120 % от заявленного значения.

Молярное замещение. От 0,05 до 2,4 и от 92 % до 108 % от заявленного значения. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Определение параметра «Молярное замещение» проводят после химической реакции гидроксиэтилкрахмала с раствором йодистоводородной кислоты в присутствии адипиновой кислоты в качестве катализатора. В результате реакции все гидроксиэтильные группы гидролизуются под действием йодистоводородной кислоты до йодэтана. Образовавшийся в результатt легколетучий йодэтан улавливается ксилольной фазой, которая в дальнейшем отбирается и подвергается газохроматографическому анализу.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл толуола и доводят объём раствора ксилолом до метки.

Испытуемый раствор. В каждый из пяти флаконов вместимостью 20 мл помещают около 50 мг (точная навеска) субстанции и 0,125±0,025 г адипиновой кислоты. Прибавляют в каждый флакон 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты. Герметично закрывают флаконы алюминиевыми колпачками с уплотнителями.

Стандартные растворы. В каждый из 7 флаконов вместимостью 20 мл помещают по 0,125±0,025 г адипиновой кислоты. Прибавляют в каждый флакон 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты. Взвешивают флаконы с точностью до 10 мкг. Прибавляют около 10 мг, 20 мг, 30 мг, 40 мг, 50 мг, 60 мг или 70 мг йодэтана с помощью шприца вместимостью 0,1 мл. Снова взвешивают флаконы с точностью до 10 мкг и уточняют количество внесённого йодэтана. Герметично закрывают флаконы алюминиевыми колпачками с уплотнителями.

Помещают флаконы в предварительно прогретый термоблок и выдерживают в течение 10 ч при температуре 150 °С. Затем охлаждают до комнатной температуры и определяют вес флаконов с точностью до 1 мг. Не принимают во внимание флаконы с потерей массы более 5 мг. Из не менее 4 флаконов с испытуемым раствором и не менее 5 флаконов со стандартными растворами отбирают по 100 мкл верхнего слоя, переносят во флаконы автосэмплера и прибавляют по 1,0 мл ксилола. Немедленно укупоривают и встряхивают.

Хроматографические условия

Колонка	кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 3 мкм;
Детектор	пламенно-ионизационный;
Газ-носитель	гелий для хроматографии;
Деление потока	1:20;
Скорость потока	8 мл/мин;
Объём пробы	1 мкл.

Температурная программа

Хроматографируют стандартные и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Толуол – 1 (около 7,5 мин), йодэтан – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартных растворов разрешение (R_S) между пиками йодэтана и толуола должно быть не менее 1,5.

Для каждой хроматограммы стандартных растворов рассчитывают отношение площади пика йодэтана к площади пика внутреннего стандарта (). Строят зависимость полученной величины от количества (мг) внесённого йодэтана. Рассчитывают параметры линейной регрессии. Коэффициент корреляции (r) должен составлять не менее 0,990.

Содержание йодэтана в испытуемом растворе в мг (Х₁) определяют по калибровочному графику.

Содержание этиленоксида в % (Х₂) вычисляют по формуле:

где	44,05	-	молекулярная масса этиленоксида;
	155,97	-	молекулярная масса йодэтана;
	a1	-	навеска испытуемой субстанции, мг.

Молярное замещение (Х₃) вычисляют по формуле:

где	44,05	-	молекулярная масса этиленоксида;
	162,14	-	молекулярная масса ангидроглюкозы.

Определяют среднее значение молярного замещения из результатов, полученных для 4 испытуемых растворов.

Натрия хлорид. Не более 0,1 %. Определение проводят методом титриметрии.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 10 г субстанции, растворяют в 100 мл воды, прибавляют 2 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 5,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 %.

Раствор сравнения. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и 100 мл воды. Прибавляют 2 мл азотной кислоты разбавленной 12,5 %.

Титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Содержание натрия хлорида в процентах (Х) рассчитывают по формуле:

где	V1	-	объём 0,1 М раствора серебра нитрата, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;
	V2	-	объём 0,1 М раствора серебра нитрата, израсходованный на титрование раствора сравнения, мл;
	a	-	навеска испытуемой субстанции, мг.

2-Хлорэтанол. Не более 5 ppm (0,0005 %). Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Растворитель. Метанол—ацетонитрил 25:75.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г 2,6-диметиланилина, растворяют в растворителе и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 20 мл растворителя и плотно закрывают. Обрабатывают ультразвуком в течение 3,5 ч, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 0,8 мл раствора внутреннего стандарта.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г (точная навеска) 2-хлорэтанола, растворяют в растворителе и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 0,8 мл раствора внутреннего стандарта.

Хроматографические условия

Предколонка	кварцевая капиллярная 10 м × 0,53 мм, покрытая слоем полиэтиленгликоля, деактивированного по отношению к полярным соединениям;
Колонка	кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 0,25 мкм;
Детектор	пламенно-ионизационный;
Газ-носитель	водород для хроматографии;
Деление потока	1:20;
Режим деления потока:	Время, мин	Состояние деления
	0	+
	0,01	-
	0,50	+
Скорость потока	2,9 мл/мин.
Объём пробы	1 мкл.

Температурная программа

	Время, мин	Температура, °C
Колонка	0–4	45
	4–23,5	45 → 240
	23,5–28,5	240
Инжектор		250
Детектор		270

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение площади пика 2-хлорэтанола должно быть не более 10 % (6 введений);

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика 2-хлорэтанола должно быть не менее 10.

Содержание 2-хлорэтанола С₂Н₅СlО в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	B1	–	отношение площади пика 2-хлорэтанола к площади пика 2,6-диметиланилина на хроматограмме испытуемого раствора;
	B0	–	отношение площади пика 2-хлорэтанола к площади пика 2,6-диметиланилина на хроматограмме стандартного раствора;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	a0	–	навеска 2-хлорэтанола, мг.

Этиленгликоль. Не более 0,004 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г высушенной субстанции и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,80 г этиленгликоля, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Постколоночный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 750 мл натрия гидроксида раствора 2 М и доводят объём раствора водой до метки.

Промывной раствор. Вода—ацетонитрил 80:20.

Хроматографические условия

Предколонка	10 × 4 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1 мл/мин;
Скорость потока постколоночного раствора	0,2 мл/мин;
Детектор	импульсно-амперометрический;
Объём пробы	20 мкл.

После не более чем 8 инъекций промывают колонку по следующей программе:

Время, мин	ПФ, %	Промывной раствор %
0–15	75	25
15–20	75 → 0	25 → 100
20–25	0	100
25–30	0 → 100	100 → 0
30–100	100	0
100–105	100 → 75	0 → 25

Хроматографируют испытуемый раствор и стандартный раствор.

Время удерживания соединений. Этиленгликоль – около 4 минут.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика этиленгликоля должно быть не менее 10,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика этиленгликоля должно быть не более 10 % (6 введений).

Допустимое содержание этиленгликоля. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика этиленгликоля не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора.

Этиленоксид. Не более 1 ppm (0,0001 %). Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография», парофазный анализ).

Испытуемый раствор. В двух флаконах для парофазного анализа растворяют по 1,0 г субстанции в 1,0 мл воды. Плотно закрывают флаконы.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мл воды. Выдерживают при 4 °С в течение не менее 30 мин. Помещают колбу на аналитические весы и медленно вносят 1,0 г (точная навеска) этиленоксида. Доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки. В двух флаконах для парофазного анализа растворяют по 1,0 г субстанции в 1,0 мл полученного раствора. Плотно закрывают флаконы.

Хроматографические условия

Колонка	кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(3)(фенил)(3)(метил)(94) силоксана, 1,5 мкм;
Детектор	пламенно-ионизационный;
Газ-носитель	гелий для хроматографии;
Деление потока	1:35;
Давление в колонке	110,3 кПа;
Объём пробы	500 мкл.

Рабочие условия камеры испарения

Температура образца	80 °С
Время уравновешивания	40 мин;
Температура линии переноса	150 °С;
Время установления давления	2,0 мин;
Время ввода пробы	3 с;
Температура иглы	100 °С;
Время выдержки	0,2 мин.

Температурная программа

	Время, мин	Температура, °C
Колонка	0–20	40
	20–30	40 → 240
	30–40	240
Инжектор		140
Детектор		250

Хроматографируют стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора Б отношение сигнал/шум (S/N) для пика этиленоксида должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примеси. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика этиленоксида не должна превышать 0,5 площади пика этиленоксида на хроматограмме стандартного раствора Б.

Потеря в массе при высушивании. Не более 15,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г субстанции

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3А или 3Б, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием стандартного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг субстанции в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,5 ЕЭ на 1 г субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

 

*Приводится для информации.