Определение фосфора в полисахаридных вакцинах

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

В общей фармакопейной статье представлена методика определения фосфора в полисахаридных вакцинахметодом спектрофотометрии.

Испытуемый раствор. В мерной колбе подходящего объёма готовят раствор с концентрацией сухого полисахаридаоколо 5 мг/мл, используя воду. Разводят раствор так, чтобы объём, используемый в испытании (1 мл) содержал около 6 мкг фосфора. Помещают 1,0 мл полученного раствора в пробирку из термостойкого стекла объёмом 10 мл.

Растворы сравнения. 0,2194 г калия дигидрофосфатарастворяют в воде и доводят тем же растворителемдо объёма 500,0 мл(основной раствор с концентрацией фосфора 0,1 мг/мл). 5,0 мл полученного раствора разводят водойдо объёма 100,0 мл (разбавленный раствор с концентрацией фосфора 0,005 мг/мл). Помещают 0,50 мл, 1,0 мл и 2,0 мл полученного растворав 3 пробирки из термостойкого стекла.

Компенсационный раствор. Готовят в пробирке из термостойкого стекла, используя 2,0 мл воды.

В каждую пробирку прибавляют по 0,2 мл серной кислоты концентрированной и нагревают в масляной бане при температуре 120 °С в течение 1 ч, а затем при температуре 160 °Сдо появления белого дыма (около 1 ч). Прибавляют по 0,1 мл хлорной кислоты и нагревают при температуре 160 °Сдо обесцвечивания раствора (около 90 мин). Охлаждают и прибавляют в каждую пробирку по 4,0 мл воды и 4,0 мл аммониямолибдата реактива. Нагревают на водяной бане при температуре 37 °С в течение 90 мин и охлаждают. Доводят объём водойдо 10,0 мл. Синяя окраска растворов должна быть устойчивойв течение нескольких часов.

Измеряют оптическую плотность (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»)растворов при длине волны 820 нм.

Строят калибровочный график зависимости значений оптической плотности трёх растворов сравнения от концентрации фосфора и с его помощью определяют концентрацию фосфора в испытуемом растворе.