-
- Главная
- Фармакопея
- ФСО
- Общая информация
Издание: | Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания |
Раздел: | Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания |
Связанные ФСО карточки: | |
Тип: | Фармакопейная статья (ФС) |
Внутр.№: | 6487.1 |
Статус: | Проект подготовлен |
Экспертная секция: | Секция стандартизации химико-фармацевтических субстанций (№ 1) |
Рассмотрение Фармакопейного комитета: | Одобрено ФК |
Рассмотрение экспертной секцией: | Одобрено экспертной секцией |
Публичное Обсуждение проекта: | Начато публичное обсуждение |
Обсуждение проекта | началось 03.05.2024 и закончится 14.06.2024 |
(2S,3S)-2-Амино-3-метилпентановая кислота.
Продукт ферментации или гидролиза белка.
Содержание: от 98,5 % до 101,0 % в пересчёте на сухую субстанцию.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или хлопья.
Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в этаноле 96 %. Растворяется в разбавленных минеральных кислотах и растворах щелочей.
А. Удельное оптическое вращение (см. раздел Испытания).
Б. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).
Образец сравнения: фармакопейный стандартный образец изолейцина.
Требование: инфракрасный спектр поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца изолейцина.
В. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Испытуемый раствор. 10,0 мг испытуемого образца растворяют в растворе 10,3 г/л хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.
Раствор сравнения. 10,0 мг фармакопейного стандартного образца изолейцина растворяют в растворе 10,3 г/л хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.
- ТСХ пластинка со слоем силикагеля TLC.
- подвижная фаза (ПФ): вода – уксусная кислота ледяная – бутанол (20:20:60 об/об/об).
- реактив для детектирования: нингидрина раствор 0,2 %.
- наносимый объём пробы: 5 мкл.
- детектирование: опрыскивание нингидрина раствором 0,2 % и нагревание при температуре 105 °С в течение 15 минут.
Требование: на хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться основная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, соответствующая ей по величине и окраске.
Раствор S. 0,5 г испытуемого образца растворяют в растворе 103 г/л хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до 10 мл.
Прозрачность раствора (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Раствор S должен быть прозрачным.
Цветность раствора (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2). Окраска раствора S не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения BY6.
Удельное оптическое вращение (ОФС «Оптическое вращение»). От +40,0 до +43,0 в пересчёте на сухую субстанцию.
1,00 г испытуемого образца растворяют в хлористоводородной кислоте 25 % и доводят объём раствора тем же растворителем до 25,0 мл.
Родственные примеси (ОФС «Аминокислотный анализ», анализ по методу 1).
Концентрации испытуемого раствора и раствора сравнения могут быть изменены в зависимости от чувствительности используемого оборудования.
Раствор А. Хлористоводородная кислота разведённая 0,037 %.
Раствор аммония хлорида (100 ppm NH4+). 10,0 мл 0,741 г/л раствора аммония хлорида доводят водой до объёма 25,0 мл.
Испытуемый раствор. 30,0 мг испытуемого образца растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.
Раствор сравнения (а). 1,0 мл испытуемого раствора доводят раствором А до объёма 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 10,0 мл.
Раствор сравнения (б). 30,0 мг фармакопейного стандартного образца валина (примесь А) растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до объёма 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 250,0 мл.
Раствор сравнения (в). 30,0 мг фармакопейного стандартного образца пролина растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до объёма 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 250,0 мл.
Раствор сравнения (г). 30,0 мг фармакопейного стандартного образца лейцина (примесь С) растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до объёма 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 250,0 мл.
Раствор сравнения (д). 6,0 мл раствора аммония хлорида (100 ppm) доводят раствором А до объёма 50,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 100,0 мл.
Раствор сравнения (е). 30,0 мг фармакопейного стандартного образца изолейцина и 30,0 мг фармакопейного стандартного образца лейцина (примесь С) растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до объёма 50,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 200,0 мл.
Контрольный раствор. Раствор А.
Примесь A (валин): (2S)-2-амино-3-метилбутановая кислота.
Примесь C (лейцин): (2S)-2-амино-4-метилпентановая кислота.
- детектор: спектрофотометрический, длина волны 440 нм и 570 нм.
Остальные условия устанавливают в соответствии с инструкцией по эксплуатации аминокислотного анализатора.
Хроматографируют эквивалентные объёмы контрольного раствора, растворов сравнения (а), (б), (в), (г), (е) и испытуемого раствора.
Пригодность хроматографической системы (раствор сравнения (е)):
- разрешение (RS): не менее 1,5 между пиками изолейцина и примеси С.
Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
Содержание примеси С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
Содержание любой другой примеси, обнаруживаемой при длине волны 570 нм, в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
площадь пика примеси единичной примеси (отличной от примесей А и С) на хроматограмме испытуемого раствора; |
|||
площадь пика изолейцина на хроматограмме раствора сравнения (а); |
Содержание любой другой примеси, обнаруживаемой при длине волны 440 нм, в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
площадь пика пролина на хроматограмме раствора сравнения (в); |
|||
Если примесь превышает порог игнорирования при обеих длинах волн, её рассчитывают при длине волны 570 нм.
- примеси А и С при 570 нм: не более 0,3 %;
- любая примесь: не более 0,2 %;
- сумма примесей: не более 1,0 %;
- неучитываемый предел: 0,05 %.
Хлориды (ОФС «Хлориды», метод 2). Не более 200 ppm
Испытуемый раствор. 0,25 г испытуемого образца растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 15 мл.
Раствор сравнения. Готовят из 10,0 мл хлорида стандартного раствора 5 мкг/мл и 5 мл воды.
Сульфаты (ОФС «Сульфаты», метод 2). Не более 300 ppm
0,5 г испытуемого образца растворяют в 3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и доводят водой до 15 мл. Раствор должен выдерживать испытание на сульфаты.
Аммония соли. Не более 200 ppm (ОФС «Аминокислотный анализ») в условиях, описанных в испытании «Родственные примеси», со следующими изменениями.
Хроматографируют эквивалентные объёмы контрольного раствора, раствора сравнения (д) и испытуемого раствора.
- аммоний при длине волны 570 нм: не более чем площадь соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения (д), с учётом пика, соответствующего аммонию на хроматограмме контрольного раствора.
Железо (ОФС «Железо», метод 2). Не более 1 ppm
1,0 г испытуемого образца помещают в делительную воронку, растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 %, встряхивая трижды, каждый раз в течение 3 мин, с раствором метилизобутилкетона порциями по 10 мл. Объединённые органические слои встряхивают с 10 мл воды в течение 3 мин. Для анализа используют водный слой.
Метилизобутилкетон раствор. 50,0 мл свежеперегнанного метилизобутилкетона встряхивают с 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствором 7 М в течение 1 мин. После разделения слоёв, нижний слой отбрасывают. Готовят перед использованием.
Потеря в массе при высушивании (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Не более 0,5 %.
1,000 г испытуемого образца высушивают в сушильном шкафу при температуре 105 °C.
Сульфатная зола (ОФС «Сульфатная зола»). Не более 0,1 %.
Определение проводят с использованием 1,0 г испытуемого образца.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требования испытания на микробиологическую чистоту.
Титриметрия. ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».
0,100 г испытуемого образца растворяют в 3 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или в присутствии 0,1 мл нафтолбензаина раствора 0,2 % в качестве индикатора до изменения окраски от коричневато-жёлтой до зелёной.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 13,12 мг C6H13NO2.
6487.1 | Изолейцин | Обсуждение до 14.06.2024 - вы здесь |