Аргинина гидрохлорид

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-Амино-5-гуанидинопентановой кислоты гидрохлорид.

L-Аргинина гидрохлорид.

Продукт ферментации или гидролиза белка.

Cодержание: от98,5 % до101,0 %в пересчёте на сухуюсубстанцию.

СВОЙСТВА

Описание.Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость.Легко растворим в воде, очень мало растворим в этаноле 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Первая идентификация: А, Б, Д.

Вторая идентификация: А, В, Г, Д.

А. Удельноеоптическое вращение (см. раздел Испытания).

Б. ИК-спектрометрия(ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Образец сравнения: фармакопейный стандартный образец аргинина гидрохлорида.

Требование: инфракрасный спектр поглощения испытуемого образца должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аргинина гидрохлорида.

В. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. 10 мг испытуемого образца растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Раствор сравнения. 10 мг фармакопейного стандартного образца аргинина гидрохлоридарастворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Условия хроматографирования:

- ТСХ пластинка со слоем силикагеля;

- подвижная фаза: аммиака раствор концентрированный 25 % – 
2-пропанол (30:70 об/об);

- наносимый объём пробы: 5 мкл;

- высушивание: при температуре 105 °С до полного исчезновения аммиака;

- детектирование: опрыскивание нингидрина раствором 0,2 % и нагревание при температуре 105 °Св течение 15 мин.

Требование:на хроматограмме испытуемого раствора должнаобнаруживаться основная зонаадсорбции на уровне основной зоныадсорбции на хроматограмме раствора сравнения, соответствующая ей по положению, величине и окраске.

Г. Качественная реакция.

Около 25 мг испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. Прибавляют 1 мл a-нафтола раствора0,1 %и 2,0 мл смеси равных объёмовнатрия гипохлорита раствора концентрированного и воды. Появляется красная окраска.

Д. Качественная реакция.

Испытуемый образец даёт реакцию (А) на хлориды(ОФС«Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S.2,5 гиспытуемого образца растворяют в воде дистиллированнойи доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Прозрачность раствора(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Раствор S должен быть прозрачным.

Цветность раствора(ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Окраска раствора S не должна быть интенсивнее окраски эталона сравнения BY₆.

Удельное оптическое вращение(ОФС «Оптическое вращение»). От +21,0 до +23,5 в пересчёте на сухую субстанцию.

2,00 г испытуемого образца растворяют в растворе 250 г/л хлористоводородной кислотыи доводят объём раствора тем же растворителем до 25,0 мл.

Нингидрин-положительные вещества(ОФС «Аминокислотный анализ»). Для анализа используют метод 1.

Концентрация испытуемого раствора, растворов сравнения и раствора для определения разрешения могут быть адаптированы в соответствии с чувствительностью используемого оборудования. Концентрации всех растворов регулируют таким образом, чтобы выполнялись требования пригодности системы в соответствии с ОФС «Хроматография», при этом сохраняя соотношения концентраций между всеми растворами.

Раствор А.Вода или буферный раствор для пробоподготовки, подходящий для используемого оборудования.

Испытуемый раствор.30,0 мг испытуемого образца растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Раствор сравнения (а). 1,0 мл испытуемого раствора доводят раствором А до объёма 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 10,0 мл.

Раствор сравнения (б). 30,0 мг L-пролина растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 250,0 мл.

Раствор сравнения (в). 6,0 мл аммония стандартного раствора 100 мкг/млдоводят раствором А до объёма 50,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до объёма 100,0 мл.

Раствор для определения разрешения. 30 мг L-изолейцина и 30 мг
L-лейцина растворяют в растворе А и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят раствором А до 200 мл.

Контрольный раствор. Раствор А.

В аминокислотный анализатор вводят подходящие равные объёмы контрольного раствора, раствора для определения разрешения, растворов сравнения и испытуемого раствора. Используют программу, подходящую для определения физиологических аминокислот.

Пригодностьхроматографическойсистемы:

- разрешение(R_S): не менее 1,5 между пиками изолейцина и лейцина.

Содержаниелюбой примеси (нингидрин-положительного вещества), зарегистрированной при длине волны 570 нм, в субстанции в процентах() вычисляют по формуле:

Содержание любой примеси (нингидрин-положительного вещества), зарегистрированный при длине волны 440 нм, в субстанции в процентах() вычисляют по формуле:

Если примесь регистрируется выше неучитываемого предела как при 570 нм, так и при 440 нм, для количественного расчёта используют результат полученный при 570 нм.

Пределы содержания примесей:

- любые примеси: не более 0,2 % каждой примеси;

- сумма примесей: не более 0,5 %;

- неучитываемый предел: 0,05 %.

Пороговые значения,указанные в разделе«Родственные примеси»(табл. 1) в ОФС «Фармацевтические субстанции», не используют.

Остаточные органические растворители(ОФС «Остаточные органические растворители»).

Сульфаты(ОФС «Сульфаты», метод 1).Не более300 ppm. 10 мл раствора S доводят водойдистиллированнойдо объёма 15 мл.

Аммоний.Аминокислотный анализ (ОФС «Аминокислотный анализ») в условиях, описанных в испытании«Нингидрин-положительные вещества»,со следующими изменениями.

Ввод проб: испытуемый раствор, раствор сравнения (в) и контрольный раствор.

Пределсодержания:

- аммоний при длине волны 570 нм: не более чем площадьсоответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения (в) с учётом пика аммония на хроматограмме контрольного раствора(0,02 %).

Железо(ОФС «Железо», метод2).Не более 10 ppm.

1,0 г испытуемого образца растворяют в 10 мл раствора 73 г/л хлористоводородной кислоты.Полученный раствор помещают в делительную воронку, встряхивают с 3 порциями по 10 млметилизобутилкетона очищенного, каждый раз встряхивая по 3 мин. К объединённым органическим слоям прибавляют 10 мл воды и встряхивают 3 мин. Используют нижний слой.

Потеря в массе при высушивании(ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Не более 0,5 %.

1,000 г испытуемого образца высушивают в сушильном шкафу при температуре 105 °С.

Сульфатная зола(ОФС «Сульфатная зола»).Не более 0,1 %.

Определение проводят с использованием 1,0 г испытуемого образца.

Тяжёлые металлы(ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).Не более10 ppm.

2,0 г испытуемого образца растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 20 мл. 12,0 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на тяжёлые металлы.

Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требования испытания на микробиологическую чистоту.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Титриметрия. ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

0,180 г испытуемого образца растворяют в 3 млмуравьиной кислоты безводной, прибавляют 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически(ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,07 мг C₆H₁₅ClN₄O₂.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.